Ten serwis zostanie wyłączony 2025-02-11.
Nowa wersja platformy, zawierająca wyłącznie zasoby pełnotekstowe, jest już dostępna.
Przejdź na https://bibliotekanauki.pl
Preferencje help
Widoczny [Schowaj] Abstrakt
Liczba wyników

Znaleziono wyników: 6

Liczba wyników na stronie
first rewind previous Strona / 1 next fast forward last
Wyniki wyszukiwania
help Sortuj według:

help Ogranicz wyniki do:
first rewind previous Strona / 1 next fast forward last
EN
The purpose of the investigation was to assess the dynamics of biomass and citric acid production in sucrose media by two invertase-positive (Suc+) Yarrowia lipolytica transformants (W 29 ura3-302 and JM23/pINA169), originating from Laboratoire de Genetique Moleculaire et Cellulaire, INRA-CNRS. The industrial strain Y. lipolytica ATCC 20 460 (W29) with Sue- phenotype was used as a control. The growth of the two strains on sucrose was as good as on glucose under the conditions favourable for the expression of invertase activity in the transformants examined, i e. in the presence of peptone and phosphate buffer at pH 6.8. The specific growth rates, µmax, were 0.5 - 0.536 h-1 and 0.492 - 0.565 h-1, respectively. The biomass yield on sucrose was 6 to 19% higher than that on glucose. Satisfactory cell growth of the two transformants was also observed in production media (based on pure sucrose or sugar beet molasses) at N deficiency and low pH 5.5. However, only W29 ura 3-302, the strain derived from the industrial strain W29, was able to produce high levels of citric acid. Maximum accumulation of the citric acid in 20% molasses broth fermented by this strain reached 50.2 g/L, which can be considered promising. However, further studies are required to improve productivity of this bioprocess. Moreover, the results obtained in the present study show that the expression of foreign SUC2 gene in Y. lipolytica, under the control of the XPR2 promoter and using the alkaline extracellular protease signal sequence (encoded by the XPR2 gene), allowed the production of citric acid on carbohydrate materials.
PL
Celem pracy była ocena dynamiki produkcji biomasy i kwasu cytrynowego w podłożach sacharozowych przez dwa inwertazo-dodatnie (Suc+) transformanty Yarrowia lipolytics W29 ura3-302 i JM23/pINA169, skonstruowane w Laboratorium Genetyki Molekularnej i Komórkowej INRA w Grignon. Jako kulturę odniesienia stosowano przemysłowy szczep Y. lipolytica ATCC 20460 (W29) o fenotypie Suc-. W warunkach sprzyjających ekspresji aktywności inwertazowej w badanych transformantach tj. przy obecności w podłożu peptonu i buforu fosforanowego, utrzymującego pH 6,8, oba szczepy rosły na sacharozie równie dobrze jak na glukozie, przy szybkości właściwej, /xmax, wynoszącej odpowiednio 0,5-0,536 h-1 i 0,492 – 0,565 h-1 (tab. 1). Plon biomasy na sacharozie był o 6-19% wyższy niż na glukozie (tab. 1). Stwierdzono również satysfakcjonujący wzrost obu transformantów w podłożach produkcyjnych (sacharozowych i melasowych), przy deficycie N i niskim pH 5,5. Jednakże tylko szczep W-29 ura 3-302, skonstruowany na bazie szczepu przemysłowego, był zdolny do produkcji większych ilości kwasu cytrynowego (tab. 2). Maksymalne nagromadzenie kwasu cytrynowego w 200 g/L brzeczce melasowej "fermentowanej" przez ten szczep wynosiło 50,2 g/L (rys. 1), co można uznać za obiecujący wynik. Niezbędne są jednak dalsze badania celem poprawienia produktywności tego bioprocesu. Badania wykazały ponadto, że kompleks ekspresji obcych genów w Y. lipolytica, włączający promotora i sekwencję sygnalną genu alkalicznej, pozakomórkowej proteazy tych drożdży, może być stosowany do konstruowania docelowych szczepów do biosyntezy kwasu cytrynowego na surowcach węglowodanowych.
PL
Przedmiotem badań była ocena zdolności 113 szczepów drożdży wyizolowanych z polskich serów z przerostem pleśni do produkcji zewnątrzi wewnątrzkomórkowych enzymów proteolitycznych i lipolitycznych. Hodowle drożdży należących do 7 gatunków: Candida famata, C. sphaerica, C. intermedia, C. kefyr, Geotrichum penicillatum, Yarrowia lipolytica i Saccharomyces kluyveri prowadzono metodą wstrząsaną w podłożu zawierającym ekstrakt drożdżowy-kazeinę-glukozę (YCG). Oznaczano zewnątrzkomórkową aktywność endopeptydazową w pH 3,0 i 7,5, odpowiednio wobec kwasowo zdenaturowanej hemoglobiny i kazeiny jako substratów. Obok zewnątrzkomórkowej aktywności proteolitycznej badano także aktywność wewnątrzkomórkową. Ocenie poddano również aktywność karboksypeptydazową, di-, tripeptydazową oraz aminopeptydazową drożdży. Aktywność zewnątrzi wewnątrzkomórkowych lipaz oznaczano metodą studzienkową.
EN
The object of this study was to evaluate the ability of 113 yeast strains isolated from Polish blue-veined cheese for the production of extracellular and intracellular proteolytic and lipolytic enzymes. Examined yeast strains belonged to 7 species: Candida famata, C. sphaerica, C. intermedia, C. kefyr, Geotrichum penicillatum, Yarrowia lipolytica and Saccharomyces kluyveri. The cultivation was performed in the shake-flasks experiment in medium YCG containing yeast extract – glucose – casein. Extracellular proteolytic activity was determined at pH 3.0 and pH 7.5 towards hemoglobin and casein, respectively. The activities of carboxypeptidase, diand tripeptidase and aminopeptidase were tested as well. In addition, extracellular lipolytic activity was investigated by well-diffusion test. It was demonstrated that differences in the extracellular and intracellular activity of lipolytic and proteolytic enzymes depended not only on the species, but also on yeast strain within a species. All the yeast species under evaluation produced extracellular lipases and their activity ranged from 7 U·mg-1 (for C. famata) to 90 U·mg-1 (for Y. lipolytica). Intracellular lipolytic activity was observed for all yeast strains (with the exception of two belonging to C. intermedia and C. famata species) however, the maximum level of 78 U·mg-1 was obtained for Y. lipolytica and C. sphaerica strains. Y. lipolytica strains showed comparatively high activities of extraand intracellular proteases active towards casein (47 and 93 U·mg-1, respectively) and the highest activities of extracellular proteases hydrolyzing hemoglobin (417–457 U·mg-1). Moreover, Y. lipolytica yeast strains had a high carboxy-, di and tripeptidase activities.
first rewind previous Strona / 1 next fast forward last
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.