Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

Enzymatyczne i chemiczne modyfikacje fosfolipidów

Chojnacka Anna, Niezgoda Natalia

Wiadomości Chemiczne

|

2023

|

[Z] 77, 5-6

449--477

EN

At the moment, phospholipids are among the most interesting molecules. The possibilities of chemical and enzymatic modifications, while maintaining their integrity and unique nature, also contribute to these compounds' great interest. This review paper concerns the preparation of new phospholipid conjugates containing fragments of biologically active compounds not found naturally in phospholipids, and phospholipids enriched with specific fatty acids with health-promoting properties (structured phospholipids). Chemical methods for the synthesis of phospholipids containing conjugated linolenic acid (CLA), dehydroepiandrosterone (DHEA) or selected non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) at the sn-1 and/or sn-2 position have been described. In addition, the evaluation of the antiproliferative activity of the obtained conjugates against selected cancer cell lines was also described. Enzymatic methods of modifying natural phospholipids leading to their enrichment with bioactive polyunsaturated fatty acids and conjugated acids have also been described.

2

Wyznaczanie energii aktywacji oraz optymalnej temperatury reakcji hydrolizy palmitynianu p-nitrofenylu katalizowanej przez lipazy

Miłek Justyna

Przemysł Chemiczny

|

2021

|

T. 100, nr 1

103--104

PL

Na podstawie modelu matematycznego opisującego wpływ temperatury na aktywność lipaz z Rhizopus oryzae 3562 oraz Enterobacter aerogenes wyznaczono energie aktywacji Ea i dezaktywacji Ed oraz optymalne temperatury Topt procesu hydrolizy palmitynianu p-nitrofenylu (p-NPP). Wartości Ead, Topt wynosiły odpowiednio 32,86±14,86 kJ/mol, 59,74±8,72 kJ/mol i 298,02 ± 3,02 K dla lipazy R. oryzae 3562 oraz 45,37 ± 16,28 kJ/mol, 59,28 ± 14,07 kJ/mol i 295,00 ± 2,74 K dla lipazy E. aerogenes. Założono, że reakcje hydrolizy p-NPP katalizowane przez badane lipazy przebiegały zgodnie z kinetyką pierwszego rzędu ze względu na stężenie enzymu.

EN

Exptl. data on the temp. relationship of lipases from Rhizopus oryzae 3562 and Enterobacter aerogenes activity published by Kumari et al. (2008), were used to calc. the optimum temp., activation energies and deactivation energies of the p-nitrophenyl palmitate hydrolysis according a resp. math. model of the reaction. The calcd. values were 298.02±3.02 K, 32.86±14.86 kJ/mol and 59.74±8.72 kJ/mol for lipase from R. oryzae 3562 and 295.00 ± 2.74 K, 45.37 ± 16.28 kJ/mol and 59.28 ± 14.07 kJ/mol for lipase from E. aerogenes.

3

The activation energies and optimum temperatures of olive oil hydrolysis by lipase porcine pancreas

Miłek Justyna

Ecological Chemistry and Engineering. S

|

2021

|

Vol. 28, nr 3

389--398

EN

Lipase activity is a perfect indicator for the monitoring of processes of bioremediation of degraded soils. Lipase is also used in the processes of oil hydrolysis in wastewater treatment. To be able to predict and model processes with used lipase in environmental operations, knowledge of the kinetic parameters of the process are required. The paper presents the determined values of activation energies and optimum temperatures for porcine pancreas lipase. The parameters were estimated based on the literature of the activity curves vs. temperature for hydrolysis of olive oil by lipase. It was noticed that concentration of gum arabic added as an emulsifier during lipase activity measurements influences on the obtained values of determined parameters. A mathematical model describing the effect of temperature on porcine pancreas lipase activity was used. Based on the comparison analysis, the optimum temperature Topt were obtained in the range from 313.30 ±0.56 to 319.62 ±0.96 K, activation energies Ea were from 51 ±10 to 82.6 ±9.9 kJ/mol, and values of deactivation energies Ed were in the range from 122.7 ±4.0 to 150.9 ±5.8 kJ/mol.

4

Aktywność metaboliczna grzybni trufli letniej Tuber aestivum/Tuber uncinatum Vittad

Jankiewicz U., Russel S., Bagińska E., Hilszczańska D.

Woda-Środowisko-Obszary Wiejskie

|

2015

|

T. 15, z. 1

59--68

PL

Celem prezentowanych badań było oznaczenie aktywności enzymów wydzielanych do podłoża przez dwie formy trufli letniej: Tuber aestivum i Tuber uncinatum Vittad. W pracy wykazano, że T. aestivum i T. uncinatum uwalniają do podłoża hodowlanego białka enzymatyczne o aktywności: lakazy, proteazy, lipazy oraz celulazy i ksylanazy. Analiza aktywności enzymatycznej w płynnych hodowlach obu form trufli letniej wykazała znaczne różnice biochemiczne pomiędzy nimi. Obserwowano zdecydowanie większą aktywność zewnątrzkomórkowych enzymów u T. aestivum, szczególnie lakazową i peptydazową. Wyniki badań wskazują na różną swoistość substratową lipaz wydzielanych przez te trufle: T. uncinatum syntetyzuje lipazy wykazujące aktywność tylko do octanu p-nitrofenolu, natomiast T. aestivum – także do palmitynianu p-nitrofenolu. W hodowlach obu form trufli wykryto niewielką aktywność celulolityczną i ksylanolityczną. Ksylanazy i celulazy oraz lakazy wydzielane przez grzybnię obu form tych trufli mogą brać udział w procesie zawiązywania symbiozy mykoryzowej.

EN

Truffle have long been appreciated for their culinary value. However, knowledge about their biochemical activity is still insufficient. Therefore, the aim of this study was to preliminarily assess the enzymatic activity of two forms of summer truffle (Tuber aestivum Vittad.). The results showed that studied fungi of the genus truffle (Tuber spp.) – T. aestivum and T. uncinatum secrete extracellular enzymatic proteins with activities of: laccase, protease lipase, cellulase and xylanase. The high activity of the enzyme was observed between 10th and 20th day of truffle cultivation in liquid culture. Higher activity of all tested enzymes was detected in the culture of T. aestivum. Significant differences observed in the level and kind of enzymatic activity might indicate different metabolic activity of studied forms of summer truffle.

5

Enancjoselektywna enzymatyczna desymetryzacja katalizowana lipazami. Część II, Optymalizacja warunków reakcji. Związki mezo

Karczmarska-Wódzka A., Kołodziejska R., Tafelska-Kaczmarek A., Przybyła T., Dramiński M.

Wiadomości Chemiczne

|

2013

|

[Z] 67, 9-10

819--841

EN

In the enzymatic asymmetric synthesis, the enzyme allows the desymmetrization of achiral compounds resulting in chiral compounds of high optical purity. Meso compounds (bearing a plane of symmetry) are very important group of compounds used in EEDs (Scheme 1) [1–4]. Similarly to prochiral compounds, selective acylation or hydrolysis of meso substrates leads to optically active products. Most lipases preferentially convert the same enantiomers in the above mentioned types of reaction. This allows the preparation of the both enantiomers of the product in high chemical and optical yield (Scheme 3–20) [35–58]. An effective enzymatic catalysis should be performed under conditions optimal for a biocatalyst performance. Hence, it is essential to select an appropriate reaction medium, the pH, and temperature [6–34]. Optimization of the reaction conditions in terms of an appropriate solvent selection is effective and most frequently the simplest way to modify the enzyme selectivity. One of the most important criteria for the solvent selection is its nature [25]. The enzyme selectivity is conditioned by its conformational rigidity, which increases in more hydrophobic medium (typical hydrophobic solvents, scCO2). A hydrophobic solvent decreases biocatalyst lability, which does not allow the connection between the structurally mismatched substrate and the active side of an enzyme [10, 26–31]. Ionic liquids are a separate group of solvents which, despite their high hydrophobicity (logP << 0) and polarity, can constitute an ideal medium for the biotransformation reactions [18–23].

6

Free fatty acids and a high initial amount of biomass in the medium increase the synthesis of mannosylerythritol lipids by Pseudozyma antarctica

Dzięgielewska E., Adamczak M.

Environmental Biotechnology

|

2013

|

Vol. 9, No. 1

14--18

EN

It was shown that the addition of lipase to a YPG cultivation medium containing 5% (v/v) of rapeseed oil increased the yield of mannosylerythritol lipids synthesized by P. antarctica from 12.69 to 26.97g·L-1 compared to the control culture. As a renewable resource of free fatty acids for P. antarctica cultivation, post-refining fatty acids (Post-FFA) were used and after 192h a 85.43g·L-1 of biosurfactant was obtained. The experiments indicated that the biosurfactant synthesis could depend on carbon source availability and biomass concentration in the cultivation medium. The supplementation of the medium after 8 days of cultivation (fed-batch culture), with glucose to 2% (w/v) and Post-FFA to 20% (v/v), did not increase the concentration of the biosurfactant in the medium but did increase the total amount of the product from about 170 to 232g. By increasing the initial concentration of the biomass to 500g·L-1, the concentration of biosurfactant was increased to 120.50g·L-1 after 168h.

7

Synteza enzymatyczna multiblokowego kopolimeru poli(bursztynianu butylenu-co-glikolu etylenowego) (PBS-EG) katalizowana lipazą B ze szczepu Candida antarctica

Gradzik B., El Fray M.

Engineering of Biomaterials

|

2013

|

Vol. 16, no. 121

42--48

PL

W pracy przedstawiono badania nad syntezą segmentowego kopoli(estro-eteru) - poli(bursztynianu butylenu-co-glikolu etylenowego) (PBS-EG) z użyciem lipazy B, pochodzącej ze szczepu Candida antarctica jako katalizatora. Polimeryzację przeprowadzono w roztworach eteru difenylowego z udziałem bursztynianu dietylu i 1,4-butanodiolu oraz poli(glikolu etylenowego) (PEG), wprowadzanego na różnych etapach reakcji, w temperaturze 80oC w warunkach zmiennego ciśnienia. Oceniono wpływ ciśnienia oraz sposobu wprowadzania PEGu na budowę chemiczną i właściwości termiczne otrzymanych kopoli(estro-eterów). Budowa chemiczna zsyntezowanych kopolimerów została oceniona na podstawie spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (1H NMR) oraz spektroskopii w podczerwieni (IR). Właściwości termiczne zbadano metodą różnicowej kalorymetrii skaningowej (DSC). Wykazano, że zastosowanie enzymu jako katalizatora prowadzi do otrzymania kopolimeru segmentowego, jednak reakcje przebiegają z dosyć niskimi wydajnościami oraz powstałe kopolimery wykazują małą wartość masy molowej. Stwierdzono również, że na większą wydajność reakcji oraz wzrost masy molowej wpływa jej prowadzenie w warunkach nadciśnienia niż podciśnienia.

EN

The paper presents studies on the synthesis of segmented copoly(ester-ether) - a poly(butylene succinate-co-ethylene glycol) (PBS-EG) using as a catalyst - lipase B derived from Candida antarctica strain. The polymerization was performed in the solutions of diphenyl ether, involving diethyl succinate and 1,4-butanediol and poly(ethylene glycol) (PEG) introduced at different stages of the reaction, at 8CPC under variable pressure. The influence of variable pressure and methods of introducing PEG monomer on the chemical structure and thermal properties of resulting copoly(ester-ether) was examined. The chemical structure of synthesized copolyesters was determined by nuclear magnetic resonance spectroscopy (1H NMR) and infrared spectroscopy (IR). The thermal properties were investigated using differential scanning calorimetry (DSC). It was observed that use of enzyme as catalyst allows to obtain a segmented copolymer, however the reactions take place with relatively low yields and molar mass. It was also found that higher yield and molar mass of the reaction was observed at overpressure than at underpressure conditions.

8

Synteza enzymatyczna poli(bursztynianu butylenu) (PBS) katalizowana lipazą B ze szczepu Candida antarctica: nowy, obiecujący materiał dla zastosowań biomedycznych

El Fray M., Gradzik B.

Engineering of Biomaterials

|

2012

|

Vol. 15, no. 115

26--31

PL

W pracy przedstawiono polimeryzację enzymatyczną biodegradowalnego poliestru - poli(bursztynianu butylenu) (PBS) przy użyciu lipazy B, pochodzącej ze szczepu Candida antarctica. Polimeryzację przeprowadzono metodą roztworową przy zastosowaniu eteru difenylowego jako medium reakcji. W celu zachowania homogeniczności mieszaniny reakcyjnej użyto estru kwasu bursztynowego, bursztynianu dietylu oraz 1,4-butanodiolu. Polimeryzację prowadzono w ustalonej temperaturze 80°C, zmieniając ciśnienie podczas etapu polikondensacji, odpowiednio 0,3; 1 i 2 mmHg. Oceniono wpływ tego parametru na budowę chemiczną i właściwości fizyko-chemiczne otrzymanego poliestru. Stwierdzono, że niskie ciśnienie zastosowane na etapie polikondensacji powoduje wzrost masy molowej (Mn), zmniejszenie ilości wolnych grup hydroksylowych oraz wzrost temperatury topnienia finalnego poliestru. Optymalne warunki prowadzenia reakcji zanotowano przy ciśnieniu rzędu 0,3 mmHg, przy którym osiągnięto wysoką wydajność reakcji (37%) i najwyższą wartość masy molowej (ponad 2,5 kDa) zaledwie po 9 h prowadzenia reakcji.

EN

In this work, the enzymatic polymerization of biodegradable polyester - poly(butylene succinate) (PBS) with the use of lipase B, derived from Candida antarctica strain is presented. The polymerization was performed by the solution method with the use of diphenyl ether as a solvent. To avoid the phase separation of monomers diethyl succinate and 1,4-butanediol were applied. The polymerization was carried out at a fixed temperature of 80°C, at variable pressure during polycondensation, namely 0.3, 1, and 2 mmHg. The influence of this parameter on the chemical structure and physico-chemical properties of resulting polyesters were examined. It was observed that low pressure used in the polycondensation facilitated an increase of the molecular weight (Mn), the reduction in -OH groups number and an increase in the melting point of the resulting polyesters. The most effective pressure conditions were found at 0.3 mmHg where relatively high yield of the reaction (37%) and the highest molecular weight (above 2.5 kDa) were found after only 9 hours of the reaction.

9

Enzymatic degradation of polycarbonate urethanes crosslinked with carbohydrates

Wojturska J.

Polish Journal of Applied Chemistry

|

2011

|

Vol. 55, nr 3-4

141-149

EN

The potential erosive effect of enzymes on polycarbonate urethanes has been evaluated. Polyurethanes were obtained in two-stage polyaddition process which involved diisocyanate (TMDI) and poly(carbonate)diol (Desmophen DC2200) The isocyanate prepolymers were crosslinked with carbohydrates (sucrosc, glucose, mannitol, sorbitol) to improve the ability of the enzyme to degrade polymer. Obtained samples were treated by lipase from Candida antarctica (Novozvm 735). Surface characteristic changes after enzymatic degradation were observed using confocal microscopy. The roughness parameters were determined. Also evaluation the degree of changes of the free surface energy was done. In addition, the thermal analysis of pre-degraded and post-degraded residue was performed.

10

Application of lipase in shaping Al2O3-mullite composites

Szafran M., Bednarek P., Piwowarski P.

Kompozyty

|

2011

|

R. 11, nr 1

90-94

EN

The paper presents the method of Direct Coagulation Casting (DCC) which is a recently developed method of near-netshaping of ceramic components at low costs. The process relies on electrostatic stabilized ceramic suspensions and their destabilization owing to time delayed in situ reactions. In the method, the enzyme-catalized reaction is used to shift the pH of the ceramic suspension to the isoelectric point, which causes coagulation of the slurry. The aim of this work is the research on shaping alumina-mullite composites with the application of a lipase-catalyzed decomposition of glycerin triacetate. Zeta potential measurements in relation to pH were performed and the appropriate substrate and enzyme was chosen to conduct controlled coagulation of ceramic slurry. In the DCC method, the optimal composition of ceramic suspension was experimentally chosen. The slip gaining a high concentration of ceramic powders, small amount of organic additives, good flow properties and the shortest time after which the intensive increase of viscosity, was considered as optimal. The paper also presents the results of the viscosity of slurries with different concentrations of dispersant and lipase. The sintering temperature leading to the best density and mechanical strength parameters was found to be 1600°C. The relative densities of DCC sintered samples were higher than 95%. The Vickers hardness and fracture toughness KIC for DCC sintered samples were measured. The main conclusion is that the DCC method, using the lipaze-catalyzed decomposition of glycerin triacetate, can be successfully applied to the formation of complex-shaped alumina-mullite composites. Very good mechanical properties can be achieved due to the low content of binders and other additives.

PL

W ostatnich latach prowadzone są intensywne badania nad zastosowaniem technik formowania elementów ceramicznych opartych na układach koloidalnych. Do jednych z takich metod należy bezpośrednie odlewanie koagulacyjne (Direct Coagulation Casting, DCC), dzięki któremu można formować elementy o skomplikowanej geometrii, stosując ceramiczne masy lejne o wysokim stężeniu fazy stałej i małej ilości dodatków organicznych. Metoda DCC jest alternatywą dla formowania metodą wtrysku, wymagającą stosowania wysokich ciśnień oraz znacznej ilości dodatków organicznych oraz dla tradycyjnego formowania przez odlewanie do porowatych form gipsowych. W artykule przedstawiono wyniki badań nad formowaniem kształtek z kompozytów tlenek glinu-mullit z wykorzystaniem reakcji enzymatycznego rozkładu trójoctanu glicerolu lipazą. Wykonano pomiary potencjału zeta w funkcji pH dla czystych proszków tlenku glinu i mullitu oraz dla kompozytu wraz z pozostałymi składnikami ceramicznej masy lejnej. Na podstawie otrzymanych wyników dobrano substrat oraz enzym, pozwalające na przeprowadzenie kontrolowanej koagulacji masy lejnej. Na drodze eksperymentalnej dobrano optymalny skład masy lejnej tak, aby lepkość układu była stosunkowo niska, a czas koagulacji masy relatywnie krotki. Przedstawiono wyniki pomiarów lepkości ceramicznych mas lejnych w funkcji czasu dla rożnych ilości upłynniacza i lipazy w masie. Otrzymane elementy spieczono w temperaturze 1600°C. Uzyskano spieki o gęstości względnej powyżej 95% oraz o wysokich wartościach twardości mierzonej metodą Vickersa i odporności na kruche pękanie KIC mierzonej metodą pomiaru długości pęknięć wykonanych wgłębnikiem diamentowym Vickersa.

11

Immobilizacja lipazy w sieci silikażelu

Jakubiak J.M., Wójcik M.J.

Chemik

|

2011

|

Vol. 65, nr 4

343-346

PL

Badano proces immobilizacji lipazy z Candida rugosa w sieci silikażelu, otrzymywanego z tetrametoksysilanu na drodze procesu zol-żel. Żelowanie przeprowadzono przy trzech stężeniach fluorku sodu, który pełnił rolę katalizatora procesu. Stwierdzono spowolnienie procesu żelowania ze zmniejszeniem stężenia katalizatora. Wykazano także niewielki wpływ wymiaru ziaren biokatalizatorów na ich aktywność oraz istotny wpływ temperatury na stabilność podczas przechowywania.

EN

The immobilization of lipase from Candida rugosa in a matrix of silica gel obtained from tetramethoxysilane by means of a sol-gel process was investigated. Gelation was effected at three concentrations of sodium fluoride which was used as the process catalyst. It was found that the gelation process was slower for lower concentrations of the catalyst. It also was demonstrated that the grain size of the biocatalysts had a minor effect on their activity while temperature had a significant effect on their stability during storage.

12

Resolution of alpha-methylserine derivatives via lipase mediated acetylation

Koźniewski B., Kamińska J. A.

Biotechnology and Food Science

|

2011

|

Vol. 75, nr 1

3-14

EN

(±)-N-Benzoyl-α-methylserine ethyl ester and (±)-4- hydroxymethyl-4-methyl-2-phenyl-1,3-oxazol-5(4H)-one were synthesized and used as substrates for enzyme catalyzed kinetic resolution in organic solvents. Several lipases active for O-acetylation of both compounds were found. The most active enzymes were screened for influence of solvent, acetyl donor type, its concentration, biocatalyst quantity and reaction temperature on resolution rate and enantioselectivity ratio E. For acetylation of (±)-N-benzoyl-α-methylserine ethyl ester with isopropenyl acetate in the presence of Novozym ® 435 the highest enantioselectivity E = 35 was found, yielding at 54% conversion (S)-N-Benzoyl-α-methylserine ethyl ester with 94% ee and (R)-O-acetyl-N-benzoyl-α-methylserine ethyl ester with 82% ee.

13

Improved properties of cotton fabrics treated with lipase and its combination with pectinase

Kalantzi S., Mamma D., Kalogeris E., Kekos D.

Fibres & Textiles in Eastern Europe

|

2010

|

Vol. 18, no. 5 (82)

86--92

EN

A commercial lipase preparation (Lipolase) was examined as a scouring agent for cotton fabrics. Application of the enzyme enabled the creation of wax-free textiles where considerable amounts of pectin and protein were removed. Compositional changes were associated with the modification of the crystallinity index and degree of polymerisation as well as improved hydrophilicity and whiteness of fabrics. Assessment of micromechanical properties by the Kawabata Evaluation System showed that lipase-mediated scouring could be as effective as conventional alkali treatment. Combining lipase with pectinase in a one-step process enabled to reduce the time required for bioscouring and forming fabrics with superior properties and excellent dyeing performance. The features desired were achieved by applying an appropriate mixture of scouring agents for suitable treatment times. The crystallinity index of fabrics could be used as a single variable for predicting their mechanical behaviour.

PL

Przeprowadzono badania nad otrzymywaniem lipazy o handlowej nazwie lipolazy, stosowanej jako środek odtłuszczający dla tkanin bawełnianych. Zastosowanie tego enzymu umożliwiło stworzenie pozbawionych wosku tkanin, z których znaczne ilości pektyny i białka zostały usunięte. Zmiany składu powiązano z modyfikacją indeks krystaliczności, stopnia polimeryzacji, jak również zwiększoną hydrofilowością i stopniem bieli tkanin. Ocena właściwości mikromechanicznych przy pomocy systemu Kawabaty wykazała porównywalną efektywność odtłuszczania modyfikowanego lipazą i tradycyjnej obróbki alkalicznej. Połączenie lipazy z pektynazą w jednostopniowym procesie umożliwiło skrócenie czasu czyszczenia biologicznego i tworzenia tkanin o wyróżniających się właściwościach i dużej wydajności barwienia. Pożądane cechy osiągnięto stosując odpowiednią mieszaninę środków odtłuszczających. Wskaźnik krystaliczności tkanin może posłużyć jako czynnik umożliwiający przewidywanie mechanicznych właściwości tkanin.

14

Lipaza - charakterystyka, zastosowanie, sposoby immobilizacji

Lasoń E., Ogonowski J.

Chemik

|

2010

|

Vol. 64, nr 2

97-102

PL

W pracy przedstawiono charakterystykę enzymu lipazy ze szczególnym uwzględnieniem jego otrzymywania, właściwości katalitycznych, które decydują o szerokich możliwościach zastosowania oraz metod jego immobilizacji.

EN

In this paper the characterization of the lipase enzyme was presented, with special consideration to its production and catalytic properties which decide about the wide-ranging applications, as well as about the methods of its immobilization.

15

Produkcja lipaz i kwasu cytrynowego z glicerolu odpadowego przez drożdże Yarrowia lipolytica

Rywińska A., Juszczyk P., Kancelista A., Biesiadecka A., Robak M., Niedbalska J.

Inżynieria i Aparatura Chemiczna

|

2009

|

Nr 3

105-106

PL

Badano zdolności drożdży Y. lipolytica Wratislavia 1.31 do produkcji enzymów lipolitycznych w hodowlach fed-batch podczas biosyntezy kwasu cytrynowego. Jako jedyne źródło węgla i energii zastosowano glicerol odpadowy oraz glicerol odpadowy z dodatkiem frakcji glicerynowej. W hodowli z glicerolem odpadowym otrzymano lipazy o wysokiej aktywności wobec tributyryny (4,7 UZT mL-1 i maślanu p-nitrofenolu 2.8 10-4 UzpNPB mL-1.

EN

A purpose of the study was to determine the ability of yeast Y. lipolyt ca Wratislavia 1.31 to produce lipases in fed-bath cultures in mediui containing raw glycerol and raw glycerol together with glycerol fra< tion.as a carbon sources during citric acid biosynthesis. A higher, enzi matic activity was observed in medium containing only raw glycen 4.7 UZT mL-1 and 2.8 10-4 UzpNPB mL-1with tributyrin and p-n tro-phenyl butyrate, respectively.

16

Kinetyczny rozdział enancjomerów kwasu migdałowego w reaktorze kolumnowym

Dąbkowska K., Szewczyk K. W., Piasecka A.

Inżynieria i Aparatura Chemiczna

|

2009

|

Nr 3

40-41

PL

Kinetyczny rozdział enancjomerów kwasu migdałowego prowadzono na drodze transestryfikacji octanem winylu katalizowanej przez lipa-zę z Burkholderia cepacia. Proces realizowano w sposób ciągły w reaktorze kolumnowym wypełnionym enzymem. Przebieg reakcji opisano modelem Bi Bi Ping Pong z inhibicją substratem i produktem.

EN

Racemic mandelic acid was separated in a column reactor using tran-sesterification with vinyl acetate catalyzed by Burkholderia cepacia li-pase. The Bi Bi Ping Pong mechanism with inhibition by both substrate and product was used in reaction rate modeling.

17

Immobilizacja lipazy metodą zol-żel

Kmiecik J., Wójcik M.

Inżynieria i Aparatura Chemiczna

|

2009

|

Nr 3

61-62

PL

Badano immobilizację lipazy z Candida rugosa metodą zol-żel. Puła-kowanie enzymu w żelu wykonano używając tetrametoksysilanu i fluorku sodu. Magnetyt dodawano, aby umożliwić separację biokatalizatora. Aktywność lipazy określano spektrofotometrycznie. Stwierdzono, że biokatalizator może być stosowany wielokrotnie w operacjach okresowych. Potwierdzono także długookresową stabilność biokatalizatora podczas przechowywania.

EN

Immobilization of lipase from Candida rugosa by sol-gel method was studied. The gel-entrapped lipase was prepared by using tetramet-hoxysilane and sodium fluoride. Magnetite was added to enable separation of biocatalyst from reaction mixture. Activities of lipase were determined spectrophotometrically. It was found that the biocatalyst can be used many times in batch operations. Long-term storage stability of biocatalyst was also confirmed.

18

Selective acetylation of pyrimidine nucleosides catalyzed by lipase goes smoothly in pyridine. Why?

Kołodziejska R., Dramiński M.

Polish Journal of Applied Chemistry

|

2004

|

Vol. 48, nr 3-4

75-81

EN

Enzymes are well known primarily as catalysts for carrying out regioselective reactions in organic syntheses. Results from enzyme - mediated protections of the hydroxy groups of pyrimidine 1-b-D-ribofuranosides and 1-b-D-2-deoxyribofuranosides have been discussed and the influence of solvent on efficiency of the syntheses has been tested. The lipase B from Candida antarctica selectivity transfers the acetyl group from vinyl acetate to the primary hydroxyl groups of various pyrimidine ribonucleosides nad 2'-deoxyribonucleosides in high yields. Conformation gauche-gauche is preferred in enzymatic acetylation, therefore the enzymatic transesteryfication is carried out faster in pyridine than in DMSO.

PL

W ciągu ostatnich lat wzrosło zainteresowanie specyficznymi właściwościami katalizatorów biologicznych. Na szczególna uwagę zasługuję enzymy lipolityczne. Lipaza jest szeroko stosowana do katalizowania reakcji hydrolizy i estryfikacji. Przeprowadzono reakcje tranestryfikacji ocatnem winylu wybranych nukleozydów i 2'-deoksynukleozydów pirymidynowych w obecnosci lipazy z Candida antarctica B. Stwierdzono, że lipaza z Candida antarctica B nie tylko umożliwia przeprowadzenie ze znaczną szybkością reakcji transestryfikacji ale przede wszystkim selektywnie wprowadza grupę acetylową na pierwszorzędową grupę wodorotlenową 1-b-D-rybofuranozydów i 1-b-D-2-deoksyrybofuranozydów pirymidynowych. Najlepsze rezultaty uzyskano prowadząc reakcję w pirydynie, prawdopodobnie substraty w tym rozpuszczalniku były bardziej dostępne dla katalizatora enzymatycznego i dlatego reakcja transestryfikacji enzymatycznej przebiegała znacznie szybciej w pirydynie niż w DMSO i DMF. Lipaza jest aktywna w każdym z użytych rozpuszczalników wobec innych substratów, przypuszczalnie korzystny przebieg naszych eksperymentów w pirydynie spowodowany jest konformacją nukleozydu określoną środowiskiem reakcji. Dla sprawdzenia tej tezy poddano analizie konformacyjnej wyjściowe nukleozydy i 2'-deoksynukleozydy pirymidynowych w stosowanych rozpuszczalnikach. Stwierdzono, że przewaga izomeru gauche-gauche (gg) sprzyja enzymatycznej reakcji transestryfikacji.

19

Zastosowanie metod fluorescencyjnych w badaniu stopnia ekspozycji reszty tryptofanowej W89 białka i lipazy z Humicola lanuginosa

Stobiecka A.

Zeszyty Naukowe. Chemia Spożywcza i Biotechnologia / Politechnika Łódzka

|

1999

|

Z. 61

5-18

PL

W prezentowanym artykule zostały przedstawione wyniki badań naturalnej fluorescencji molekuły lipazy pleśniowej z Humicola lanuginosa. W przeprowadzonych eksperymentach zastosowano technikę wygaszania emisji reszt tryptofanowych białka lipazy jonami I- w celu zbadania zmian konformacyjnych katalitycznego obszaru enzymu. Zgodnie z rezultatami wykonanych pomiarów, trzy spośród czterech reszt tryptofanowych (tj.: W/77, W221 oraz W260) stanowią frakcją niewygaszalną jonami I- zaś jedynie reszta W89 dostępna jest dla zastosowanego wygaszacza. Wyniki badań porównawczych przeprowadzonych dla natywnej oraz zainhibowanej formy lipazy świadczą o tym, iż stopień ekspozycji reszty W89 jest bezpośrednio skorelowany z lokalizacją α-helikalnego fragmentu lańcucha polipeptydowego lipazy, tzw. "wieczka", względem szkieletu białkowego enzymu. W czasie przejścia konformacyjnego z "zamkniętej" (natywnej) do "otwartej" (zainhibowanej) formy biokatalizatora obserwowany jest wzrost wartości stałej Sterna-Volmera wyznaczonej dla reszty W89 od 3,29 M-1 do 4.23 M-1 (λex=295 nm).

EN

The steady-state fluorescence quenching measurements have been performed to study different forms of the fungal lipase from Hurmcola lantiginosa (HLL). The intrinsic fluorescence of W89 residue, located in the 'lid' region, has been used as a probe for the dynamics of protein. The iodide-quenching data showed that three of four tryptophans (i.e. W117, W221 and W260 residue) within HLL lipase were totally inaccessible to the quencher. On the contrary, W89 residue was available for I-. Using steady-state iodide fluorescence quenching data and the fluorescence quenching-resolved-spectra (FQRS) method the total emission spectrum of the native lipase has been decomposed into two spectral components. One of them, unquenchable by iodide, has a maximum of fluorescence emission at the range: 333-337 nm and the second one, exposed to the solvent, emits at 343-346 nm (at λex between 295 and 305 nm, respectively). The resolved spectrum of the redder component corresponds to die W89 residue which participates in about 70% of the total HLL emission. The dynamic Stern-Volmer quenching constants calculated for native ('closed-lid') and inhibited ('open-lid') lipase were: 3.29 M-1 and 4.23 M-1, respectively. The values obtained indicate that W89 is not deeply buried in the protein matrix. The steady-state fluorescence quenching studies of native and inhibited HLL lipase with potassium iodide show that two different conformations of the enzyme caused by limiting movement of the short a-helical 'lid' can be monitored using fluorescence properties of W89 residue.