Znaleziono wyników: 2
Liczba wyników na stronie
Wyniki wyszukiwania
antibodies against the native lipase of rapeseed was obtained after Sephadex G-100 gel separation of supernatant proteins obtained by centrifuging (23 000g x 30 min) the enzymie extract from rapeseed of Bolko variety. In the enzymie extracts (crude enzymie extract, fraction of lipid bodies, microsomal fraction) from the germinated seeds of both rapeseed varieties the affinity to the obtained antibodies was found in the protein fractions with electrophoretic mobilitis corresponding with to those of proteins with the molecular weight of 97 kDa, 84 kDa and 65 kDa-64 kDa-62 kDa.
poliklonalnych przeciwciał przeciwko rodzimej lipazie nasion rzepaku uzyskano po rozdziale na żelu Sephadex G-100 białek supernatantu, otrzymanego w wyniku ultrawirowania (23 000g x 30 min) ekstraktu enzymatycznego z nasion rzepaku odmiany Bolko. W badanych ekstraktach enzymatycznych (surowy ekstrakt enzymatyczny, frakcja tzw. ciał lipidowych, frakcja mikrosomalna) ze skiełkowanych nasion obu odmian rzepaku, powinowactwo do otrzymanych przeciwciał wykazały frakcje białkowe o ruchliwości elektroforetycznej odpowiadającej ruchliwości białek o ciężarach molekularnych :97 kDa, 84kDa oraz 65kDa-64kDa-62kDa.
obtained supernatant was used to chracterise the lipase and further to purify by a column chromatography method, using the following carriers: Sephadex G-100, Sephacryl S-300, DEAE sephadex A-50 and Q Sepharose. Examined enzymatic extracts showed two optima of lipolytic activity: pH 7.5 and pH 9.0. The highest degree of hydrolysis of tributyrylglicerol (TC 4 : 0) revealed lipases of the Bolko variety seeds at 30°C, and lipases of the Skrzeszowicki seeds at 40°C. At the temperature 30 - 40°C lipases maintained approx. 89 % to 93 % of their maximum activity. However, at 25°C and 50°C their activity was reduced to approx 20 %. When the temperature was above 40°C, thermal inactivation of lipolytic enzymes from two varieties progressed in two stages. Examined lipases maintained 20 % to 30 % of their initial activity, after storing them for 1 h at 60°C. During the purification of lipases, carried out by a column chromatography method, the most favourable results were obtained using molecular filtration on Sephadex G-100 gel.
a uzyskany supernatant zastosowano do scharakteryzowania lipazy i dalszego oczyszczania metodą chromatografii kolumnowej z wykorzystaniem następujących nośników: Sephadex G-100, Sephacryl S-300, DEAE Sephadex A-50 i Q Sepharose. Badane ekstrakty enzymatyczne wykazywały dwa optima aktywności lipolitycznej: pH 7.5 i pH 9.0. Najwyższym stopniem hydrolizy tributyryloglicerolu (TC 4 : 0) charakteiyzowały się lipazy z nasion odmiany Bolko w temperaturze 30°C, zaś lipazy z nasion odmiany Skrzeszowicki w temperaturze 40°C. W przedziale temperatur 30 - 45°C lipazy zachowywały od ok. 89 do 93 % swojej aktywności maksymalnej, a w temperaturach 25 i 50°C ich aktywność zmniejszała się o ok. 20 %. W temperaturach powyżej 40°C inaktywacja termiczna enzymów lipolitycznych obu odmian przebiegała dwufazowo. Badane lipazy zachowywały 20 % do 30 % aktywności początkowej po 1 godzinie przetrzymywania w temperaturze 60 °C. Podczas oczyszczania lipaz metodą chromatografii kolumnowej, najkorzystniejsze wyniki uzyskano stosując sączenie molekularne na żelu Sephadex G-100.
Ograniczanie wyników