Wyniki wyszukiwania - Biblioteka Nauki

1

Effect of Pyrethroids on Stress-Induced Biosynthesis of Selected Haemoproteins in Saccharomyces cerevisiae Yeast Cells

100%

Krzepiłko A.

|

2009

|

tom Vol. 16, nr 5/6

607-615

EN

The cellular response to stress is a basic protective mechanism enabling cells to adapt to changing environmental conditions. Logarithmic cultures of Saccharomyces cerevisiae yeast are a good model for research on this topic, because the stress response is accompanied by induction of biosynthesis of haemoproteins such as catalase and cytrochromes. In wild-type yeast cells growing on YPG medium containing 2 % glucose, catalase activity in the logarithmic culture is low. Cytochrome spectra under these conditions are flat, indicating low respiratory complex activity. Stress conditions induce expression of the gene CTTl, which codes for catalase T, and the enzyme is synthesized de novo. Within a short time catalase T activity increases sharply, attaining a value characteristic of the stationary phase of growth. Similarly, induced biosynthesis of cytochromes takes place under stress conditions. This study investigated the effect of pyrethroids on stress-induced biosynthesis of these haemoproteins in S. cerevisiae cells. The experiments were conducted on a standard wild-type strain of yeast. The yeast cultures were grown in liquid YPG medium. The effect of pyrethroids (deltamethrin, esfenvalerate and cypermethrin) on induced biosynthesis of haemoproteins was studied under conditions of alcohol stress or osmotic stress (induced by sodium chloride or sodium nitrate). Catalase activity was determined and low-temperature cytochrome spectra of the yeast cells were performed. Application of pyrethroids and stress conditions at the same time was found to inhibit synthesis of haemoproteins, ie catalase T and cytochromes.

PL

Odpowiedź komórek na stres jest podstawowym mechanizmem ochronnym, pozwalającym dostosować się do zmieniających się warunków środowiska. Logarytmiczne hodowle drożdży Saccharomyce cerevisiae są dobrym modelem do tego typu badań, ponieważ reakcji na stres towarzyszy m.in. indukcja biosyntezy białek hemowych, takich jak katalaza i cytochromy. W komórkach drożdży szczepu dzikiego rosnących na pożywce YPG zawierającej 2 % glukozy w logarytmicznej fazie wzrostu hodowli poziom aktywności katalazy enzymu jest niski. Widma cytochromowe w tych warunkach są płaskie, co informuj o małej aktywności kompleksów oddechowych. Warunki stresu wywołują indukcję ekspresji genu CTT kodującego katalazę T i enzym ten jest syntetyzowany de novo. W ciągu krótkiego czasu poziom aktywności katalazy T gwałtownie wzrasta, osiągając wartość charakterystyczną dla stacjonarnej fazy wzrostu komorę drożdży. Podobnie pod wpływem stresu zachodzi indukowana biosynteza białek cytochromowych. Badano wpływ pyretroidów na przebieg indukowanej przez warunki stresu biosyntezę tych białek hemowych w komórkach drożdży S. cerevisiae. Doświadczenia przeprowadzono na standardowym szczepie dzikich drożdży. Hodowle drożdży prowadzono w pożywce płynnej YPG. Wpływ pyretroidów (esfenwalerat, deltametryna, cypermetryna) na indukowaną biosyntezę białek hemowych badano w warunkach stresu: alkoholowego lub osmotycznego (wywoływanego przez chlorek sodu lub azotan(V) sodu). Oznaczano aktywność katalazy i wykonano niskotemperaturowe widma cytochromowe komórek drożdży. Stwierdzono że równoczesne stosowanie pyretroidów i warunków stresu powoduje zahamowanie indukowanej syntezy białek hemowych, to jest katalazy T i cytochromów.

2

Wpływ wybranych pyretroidów na stężenie grup tiolowych w ekstraktach z komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae

100%

Krzepiłko A.

|

tom Vol. 2, No. 2

451--454

PL

Pyretroidy, zaliczane do insektycydów, są estrami alkoholi pierwszo- lub drugorzędowych, zawierającymi przynajmniej jedno wiązanie podwójne i kwasu chryzantemowego [kwasu 3-(2,2-dimetylowinylo)-2,2-dimetylocyklopropanokarboksylowego]. Typowy mechanizm działania pyretroidów polega na blokowaniu kanałów jonowych w układzie nerwowym owadów. Związki te oddziałują niespecyficznie także na inne organizmy i powodują nieprawidłowe procesy metaboliczne, wpływają na aktywność różnych enzymów. Te niespecyficzne skutki działania pyretroidów mogą być powiązane z generowaniem wolnych rodników. Celem prezentowanej pracy było określenie zmian zawartości grup tiolowych w ekstraktach z komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Komórki drożdży hodowano na pożywce YPG do fazy logarytmicznej lub stacjonarnej, inkubowano z różnymi stężeniami pyretroidów: bifentryny, cypermetryny i deltametryny przez dwie godziny. Następnie przygotowano ekstrakty z komórek drożdży i oznaczono w nich zawartość grup tiolowych za pomocą odczynnika Ellmana zawierającego DTNB. StęŜenie grup tiolowych wyrażono w ekwiwalencie mM GSH. Stwierdzono, że inkubacja komórek drożdży z pyretroidami powoduje obniżenie stężenia grup tiolowych w ekstraktach. Następnie wykonano barwienie komórek drożdży na obecność zredukowanego glutationu barwnikiem fluorescencyjnym mBCl. Inkubacja komórek z pyretroidami powodowała zmniejszenie intensywności fluorescencji, co sugeruje zmniejszenie stężenia zredukowanego glutationu. Uzyskane wyniki sugerują, że zmiany stężenia grup tiolowych mogą być przydatnym markerem stresu oksydacyjnego w badaniach nad toksycznością pyretroidów.

EN

Pyrethroids are esters of primary or secondary alcohols containing at least one double bond and chrysanthemic acid (2,2-dimethyl-3-(2-methylpropenyl)-cyclopropanecarboxylic acid). Pyrethroids are insecticides whose typical mechanism of action is the blocking of ion channels in the nervous system of insects. These compounds also have non-specific effects on other organisms. They cause abnormal metabolic processes, affect the activity of various enzymes and can have genotoxic effects. These non-specific effects of pyrethroids may involve free radical generation. The aim of this study was to assess changes in the content of thiol groups in Saccharomyces cerevisiae yeast cell extracts. The cells were cultivated on YPG medium to the logarithmic or stationery phase and incubated for two hours with various concentrations of the pyrethroids bifenthrin, cypermethrin and deltamethrin. Then extracts were prepared from the yeast cells and their thiol group content was determined using Ellman's reagent (DTNB). Concentration of thiol groups was expressed as mM of GSH equivalent. It was found that incubating yeast cells with pyrethroids caused a reduction in concentration of thiol groups in the extracts. Subsequently the yeast cells were stained to test for the presence of reduced glutathione using the fluorescent stain mBCl. Incubating the cells with pyrethroids caused a decrease in fluorescence intensity, which suggests a decreased concentration of reduced glutathione. The results obtained suggest that changes in concentration of thiol groups can be a useful oxidative stress marker in studies on pyrethroid toxicity.

3

Pomiar całkowitej zdolności antyoksydacyjnej wybranych antyoksydantów i naparów metodą redukcji rodnika DPPH

63%

Zych I. , Krzepiłko A.

Chemistry-Didactics-Ecology-Metrology

|

2010

|

tom R. 15, NR 1

51--54

PL

Antyoksydanty są obecne w wielu produktach żywnościowych. Są one niezmiernie ważne dla zdrowia i dobrego samopoczucia. Występują m.in. w ziołach, kawie, herbacie oraz innych produktach pochodzenia roślinnego. W prezentowanej pracy opisana została metoda DPPH badania zdolności antyoksydacyjnej. Stosując tę metodę, porównano właściwości antyoksydacyjne: kwasu galusowego, kwasu kawowego, kwasu askorbinowego, palmitynianu kwasu askorbinowego, glutationu zredukowanego, L-cysteiny, α-tokoferolu, troloksu oraz handlowych herbat ziołowych: melisy, rumianku, mięty, lipy, herbaty czarnej, herbaty zielonej oraz kawy mielonej i kawy rozpuszczalnej. Przedstawiona metoda może zostać wykorzystana jako ćwiczenie laboratoryjne dla studentów różnych kierunków studiów przyrodniczych. Celem takich ćwiczeń jest zapoznanie z metodyką pomiaru zdolności antyoksydacyjnych metodą DPPH, poznanie skuteczności antyoksydacyjnej wybranych związków w tej reakcji oraz oznaczenie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej. Stwierdzono, że badane antyoksydanty i napary charakteryzują się zróżnicowanymi właściwościami antyoksydacyjnymi. Najlepsze właściwości antyoksydacyjne z przebadanych przeciwutleniaczy wykazuje kwas galusowy, natomiast spośród naparów - zielona herbata.

EN

Antioxidants, which are present in many food products, are extremely important for human health. They occur in herbs, coffee, tea, and other products of vegetable origin. This paper describes the DPPH method for testing antioxidant capacity. The method was used to compare the antioxidant properties of gallic acid, caffeic acid, ascorbic acid, ascorbyl palmitate, reduced glutahione, L-cysteine, α-tocopherol, and trolox, as well as black tea, green tea, ground coffee, instant coffee, and commercial herbal teas: lemon balm, chamomile, peppermint, and lime blossom. The experiments described in the paper can be used as laboratory exercises for students in various fields of the natural sciences. The goal of such exercises is to learn how to measure antioxidant capacities using the DPPH method, to assess the antioxidant effectiveness of selected compounds in this reaction, and to determine the total antioxidant capacity of infusions. The antioxidants and infusions tested were shown to have varying antioxidant properties. Gallic acid exhibited the highest antioxidant capacity among the antioxidants tested, while green tea had the highest capacity among the infusions.

4

Comparison of the Antioxidant Properties of Selected Edible Sprouts from the Cruciferae Family

63%

Zych-Wężyk I. , Krzepiłko A.

|

2012

|

tom Vol. 19, nr 8

921-930

EN

Germinating seeds of the Cruciferae family are a natural source of valuable nutrients. The aim of this study was to compare the antioxidant properties of selected edible sprouts of the Cruciferae family using different methods. We tested seeds of broccoli, white mustard, red cabbage and cardamine purchased from PNOS Ozarow Mazowiecki S.A. The seeds germinated on Petri dishes lined with filter paper in natural light conditions at 22 oC, with no added nutrients. Aqueous extracts from the seedlings were prepared according to the method described by Zielinski and Kozlowska. Three methods were used to measure the total antioxidant capacity of the extracts: one using ABTS, one by Brand-Williams et al based on the properties of DPPH, and one using DMPD. Antioxidant content was expressed in M of Trolox per 1g fresh weight of seedlings. Substantial differences were found in the antioxidant properties of the extracts tested. The highest values were obtained using the DMPD and ABTS methods. The richest sources of antioxidants were the extracts from red cabbage and white mustard sprouts in the first day of growth. The extract from the cardamine sprouts had the lowest antioxidant properties. The antioxidant content in the seedlings decreased with growth time. The results presented indicate which sprouts have the highest antioxidant properties as well as the optimal time for consuming them.

PL

Kiełkujące nasiona roślin Krzyżowych są naturalnym źródłem cennych składników odżywczych. Celem pracy było porównanie różnymi metodami właściwości antyoksydacyjnych wybranych jadalnych kiełków z rodziny kapustowatych. W badaniach zastosowano nasiona brokuła, gorczycy białej, kapusty czerwonej i rzeżuchy zakupione w firmie PNOS w Ożarowie Mazowieckim S.A. Nasiona kiełkowały na szalkach Petriego wyłożonych bibułą filtracyjną, w naturalnych warunkach oświetlenia, w temperaturze 22 oC, bez dodatku składników odżywczych. Wodne ekstrakty z siewek przygotowano wg metody opisanej w pracy Zieliński i Kozłowska. Do pomiaru całkowitej zdolności antyoksydacyjnej ekstraktów z siewek zastosowano trzy metody: metodę ABTS, metodę Brand-Wiliams i współpr. opartą o właściwości DPPH oraz metodę z DMPD. Zawartość antyoksydantów wyrażano w mmolach troloxu na 1 g świeżej masy siewek. Badane ekstrakty znacznie różniły się właściwościami przeciwutleniającymi. Najwyższe wartości pomiarów uzyskano w metodzie DMPD i ABTS. Najbogatsze źródło przeciwutleniaczy stanowił ekstrakt z kiełków kapusty czerwonej i gorczycy białej sporządzony w pierwszym dniu hodowli. Ekstrakt z kiełków rzeżuchy charakteryzował się najniższymi właściwościami przeciwutleniającymi. Zawartość antyoksydantów w siewkach spadała w miarę czasu trwania hodowli. Prezentowane wyniki badań umożliwiają wskazanie kiełków o najwyższych właściwościach antyoksydacyjnych, a także pozwolą wybrać optymalny czas ich spożycia.