A liquid chromatographic method for simultaneous determination of chlorophylls and carotenoids in fresh conifer needles

• Autorzy: Štěrbová, D. , Klejdus, B. , Kubáň, V.

Warianty tytułu

PL

Metoda chromatografii cieczowej w zastosowaniu do równoczesnego oznaczania chlorofili i karotenoidów w świeżych szpilkach drzew iglastych

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

A liquid chromatographic method for the separation of neoxanthin, violaxanthin, lutein, zeaxanthin, chlorophyll a, chlorophyll b, a-carotene and /J-carotene on the column Zorbax RX Cg (5 um, 150 x 2.1 mm I.D.) with photometric detection at 440 nm was optimized. An acetonitrile-water mixture, of a linearly increasing v/v ACN content (from 85% to 100% in 13 min and from 100% to 95% during the next 5 min) was used as a mobile phase. Its flow rate was established to 0.3 mL min'1 and the temperature of 20°C was set. Calibration curves were linear in the concentration ranges of 0.5-100 ng/inj. and 30-2600 ng/inj. for carotenoids and chlorophylls, respectively. Detections limits (LODs) in the range 0.1-0.5 ng/inj. and RSDs less than 1% (n = 5) were obtained. The results were compared with those obtained from dual-wavelength spectrophotometric measurements. The methods were applied to the determination of the concentration changes of the pigments in fresh conifer needles of bristlecone pine (Pinus aristata, Engellman) during eclipse on August 11,1999.

PL

Zoptymalizowano metodę chromatografii cieczowej do rozdzielania, neoksantyny, wiolaksantyny, luteiny, zeaksantyny, chlorofilu a, chlorofilu b, a-karotenu and ^3-karotenu przy użyciu kolumny Zorbax RX Cg (5 um, 150 x 2.1 mm I.D.) z detekcją fotometryczną przy długości fali 440 nm. Jako fazę ruchomą zastosowano mieszaninę acetonitrylu i wody. Liniowy gradient składu wynosił od 85% do 100% acetonitrylu w ciągu 13 min oraz od 100% do 95% acetonitrylu w ciągu następnych 5 min, szybkość przepływu 0,3 mL min(-1), temp. 20°C. Wykresy kalibracyjne były liniowe w zakresie stężeń (w próbkach zadozowanych) 0,5-100 ng i 30-2600 ng odpowiednio dla karotenoidów i chlorofili.

Słowa kluczowe

PL

chromatografia cieczowa; spektrofotometria; pigment; szpilki sosnowe; Pinus aristata; zaćmienie słońca

EN

liquid chromatography; spectrophotometry; pigments; conifer needles; Pinus aristata; Eclipse

• Czasopismo: Chemia Analityczna
• Rocznik: 2003
• Tom: Vol. 48, No. 2
• Strony: 233-241
• Opis fizyczny: Bibliogr. 20 poz.

Twórcy

autor

Štěrbová, D.

• Department of Chemistry and Biochemistry, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska 1, CZ-61300 Brno, Czech Republic

autor

Klejdus, B.

• Department of Chemistry and Biochemistry, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska 1, CZ-61300 Brno, Czech Republic

autor

Kubáň, V.

• Department of Chemistry and Biochemistry, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska 1, CZ-61300 Brno, Czech Republic,

Bibliografia

• 1. Kiehne A., Dachtler M. and Glaser T., Application Note #LCMS-10, Bruker Daltonic (1999).
• 2. Hoque E., J. Chromatogr., 448, 417 (1988).
• 3. Hegazi M.M., Pérez-Ruzafa A., Almela L. and Candela M.-E., J. Chromatogr., 829, 153 (1998).
• 4. Wellburn A.R., Robinson D.C. and Wellburn F.A.M., Planta, 154, 259 (1982).
• 5. Scholz B. and Ballschmiter K., J. Chromatogr., 208, 148 (1981).
• 6. Sieferman-Harms D., J. Chromatogr., 448, 411 (1988).
• 7. Kopecký J., PhD. Thesis, Institute of Microbiology, CAS, Třeboň (1992).
• 8. Francis G.W., Huseby B. and Andersen O.M., Chromatographia, 35, 189 (1993).
• 9. Ruddat M. and Will O.H., Meth. Enzym., 111, 189 (1985).
• 10. De las Rivas J., Abadia A. and Abadia J., Plant. Physiol., 91, 190 (1989).
• 11. Juhler R.K. and Cox R.P., J. Chromatogr., 508, 232 (1990).
• 12. Gilmore A.M. and Yamamoto H.Y., J. Chromatogr., 543, 137 (1991).
• 13. Schoefs B., Bertrand M. and Lemoine Y., J. Chromatogr., 692, 239 (1995).
• 14. Lauren D.R., McNaughton D.E. and Agnew M.P., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70, 428 (1987).
• 15. Thayer S.S. and Bjorkman O., Photosynth. Res., 23, 331 (1990).
• 16. Darko E., Schoefs B. and Lemoine Y., J. Chromatogr., 876, 111 (2000).
• 17. Vitamvásová D., PhD. Thesis, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Brno, 2000.
• 18. Lichtenthaler H.K. and Wellburn A.R., Biochem. Soc. Transactions, 603, 591 (1983).
• 19. Navaro S., Almela L. and Garcia A.L., Photosynthetica, 16, 134 (1982).
• 20. Hawkins C.D.R., Lister G.R., Fink R.P. and Vidaver W.E., Plant Physiol., 51, 175 (1981).