Properties of immobilized and free lipase from Rhizopus cohnii

• Autorzy: Krakowiak A. , Trzcinska M. , Sieliwanowicz R. , Sawicka-Zukowska R. , Jedrychowska B. , Ajzenberg V.

Warianty tytułu

PL

Właściwości unieruchomionej i wolnej lipazy z Rhizopus cohnii

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Rhizopus cohnii lipase was immobilized by adsorption on porous chitosan polyphosphate beads. The obtained preparation, active against fatty acids esters of p-nitrophenol and against olive oil, was characterised and compared with the free enzyme. Both lipase forms displayed the highest activity at pH 8-9. The optimum activity temperature of free and immobilized lipase was 37°C and 30°C, respectively. Immobilization did not significantly change the thermal stability of lipase in comparison with the free enzyme. Both forms of the enzyme were stable at 30°C, they lost half of their activity within 45-50 min at 50°C, and at 60°C they were fully inactivated within 10 min. Affinity to p-nitrophenylpalmitate (pNPP) for both the free and immobilized lipase was identical and amounted Km=0.2 mmol/L. With the use of HPLC, enzymatic hydrolysis of olive oil by the free and immobilized lipase was compared with the chemical hydrolysis of this substrate. It was found that both forms of the enzyme were active only against emulsified substrate, and the chromatograms of products of reactions catalysed by free and immobilized lipase showed no qualitative differences. Among the products of olive oil degradation by both forms of the enzyme, fractions identified as palmitic and linoleic acids were detected, whereas oleic acid, normally generated in the largest amount after chemical hydrolysis, was not detected.

PL

Lipazę otrzymaną z grzyba Rhizopus cohnii unieruchamiano metodą adsorpcji na porowatych perełkach polifosforanu chitozanu. Otrzymany kompleks, aktywny wobec estrów p-nitrofenolu i oliwy z oliwek, porównywano z analogicznym enzymem wolnym. Unieruchomiona i wolna lipaza wykazywała najwyższą aktywność w pH 8-9 (rys. 2). Optymalna temperatura działania lipazy unieruchomionej wynosiła 30°C zaś lipazy wolnej 37°C. Unieruchomienie nie zmieniało istotnie stabilności termicznej lipazy. Obie formy enzymu wykazywały stabilność w temperaturze 30°C, w temperaturze 50°C połowę aktywności traciły po 45-50 minutach, a w 60°C po 10 minutach następowała całkowita jej inaktywacja. Powinowactwo do p-nitrofenylopalmitynianu lipazy unieruchomionej i wolnej było identyczne i osiągało wartość Km=0,2 mmol/L (tab. 3). Wykorzystując technikę HPLC porównano enzymatyczną hydrolizę oliwy z oliwek stosując unieruchomioną i wolną lipazę. Stwierdzono, że obie formy enzymu działały wyłącznie na zemulgowany substrat, a chromatogramy obrazujące produkty reakcji katalizowane przez unieruchomioną i wolną lipazę nie wykazywały różnic jakościowych. Wśród produktów degradacji oliwy z oliwek dokonanej przez obie formy enzymu wykryto frakcje identyfikowane jako kwas palmitynowy i linolenowy, nie wykryto natomiast kwasu oleinowego zwykle pojawiającego się w znacznych ilościach po hydrolizie chemicznej.

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 2003
• Tom: 12/53
• Numer: 3
• Opis fizyczny: p.39-44,fig.,ref.

Twórcy

autor

Krakowiak A.

• Institute of Agricultural and Food Biotechnology in Warsaw, Rakowiecka 36, 02-532 Warsaw, Poland

autor

Trzcinska M.

autor

Sieliwanowicz R.

autor

Sawicka-Zukowska R.

autor

Jedrychowska B.

autor

Ajzenberg V.

Uwagi

Rekord w opracowaniu