Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

HPLC determination of methotrexate and its metabolites in blood plasma

Skibińska Ł., Gregorczyk J., Jarmołowicz A.

Chemia Analityczna

|

2005

|

Vol. 50, No. 3

551-560

EN

Methotrexate (MTX) and its main metabolites: 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino- -N10-methyIpteroic acid were simultaneously determined by HPLC method in human plasma sample. They were isolated from the matrix applying a solid-phase extraction procedure on a Bakerbound SPE C18 column. The mean percentage recovery was 79.0, 86.9 and 85% for methotrexate, 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino-N10-methylptreroic acid, respectively. Chromatographic separation of the analytes was performed on the reversed-phase C18 column and isocratic elution with the phosphate buffer (pH 6.5) containing 7% of acetonitrile, 2% of N,N-dimethylformamide and 0.2% of 30% hydrogen peroxide was applied. p-Aminoacetophenone served as the interna! standard. At the outlet of the column the eluent was irradiated by with UV light of 254 nm to convert the analytes to their fluorescent derivatives. The excitation and emission wavelenghts were 350 and 436 nm, respectively. Quantitation limit of the investigated compounds was 0.075 ug mL-1.

PL

Opracowano metodę wysokosprawnej chromatografii cieczowej do oznaczania metotrek-satu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino-N10-metyloptero iłowego w osoczu pacjentów. Ekstrakcję metotreksatu i jego metabolitów z płynu biologicznego przeprowadzono na fazie stałej w kolumnie Bakerbound SPE C18. Średnia wydajność ekstrakcji wynosiła 79,0, 86,9 i 85% dla metotreksatu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino -N10-rnetylopteroilowego. Rozdział chromatograficzny przeprowadzono na kolumnie RP-C|sub>18. Fazę ruchomą stanowił bufor fosforanowy (pH 6,5) zawierający 7% acetonitrylu, 2%N,N-dimery loformamidu oraz 0,2% wody utlenionej (30%). Jako wzorzec wewnętrzny zastosowano p-aminoacetofenon. Wypływający z kolumny eluent naświetlano promieniowaniem UV o długości fali λ = 254 nm w celu otrzymania fluorescencyjnych pochodnych badanych analitów. Zastosowano detekcję spektrofiuorymetryczną przy długości fali promieniowania wzbudzającego 350 nm i emitowanego 436 nm. Granica oznaczalności dla analizowanych związków wynosiła 0,075 ng mL-1.

2

HPLC method for the determination of methotrexate and 7-hydroxymethotrexate in children with acute lymphoblastic leukemia

Skibińska Ł., Gregorczyk J.

Chemia Analityczna

|

2001

|

Vol. 46, No. 3

329-336

EN

A sensitive high-performance liquid chromatographic method for simultaneous determination of methotrexate and its main metabolite 7-hydroxymethotrexate in serum and saliva is reported. The method involved solid phase extraction on Bakerbond SPE Cm cartridges. The percentage recovery from both biological fluids was 87 and 80% for methotrexate and 7-hydroxymethotrexate. The samples were chromatographed on a LiChrospherRP-18 column using phosphate buffer at pH 5.75 (84%), methanol (11%) and acetonitrile (5%) as a mobile phase. The effluent from the column was monitored at 305 nm./7-Aminoacetophenone was used as an internal standard. The method is selective and reproducible. The limit of detection for the determination of methotrexate and its metabolite in serum and saliva was 5 ng ml(-1), whereas the limit of quantitation was 25 ng ml(-1) for both compounds.

PL

Zastosowano .czułą, selektywną i precyzyjną metodę HPLC oznaczania obok siebie metotreksatu i jego głównego metabolitu 7-hydroksymetotreksatu w surowicy i ślinie pacjentów. Analizę chromatograficzną poprzedzono ekstrakcją leku i metabolitu na fazie stałej wykorzystując kolumny Bakerbond SPE Cis. Rozdział chromatograficzny przeprowadzono na kolumnie RP-18 stosując detektor spektrofotometryczny przy długości fali Lamda = 305 nm. Fazę ruchomą stanowiła mieszanina buforu fosforanowego o pH 5,75, metanolu! acetonitrylu(84:11:5 v/v). Zastosowano p-aminoacetofenon jako wzorzec wewnętrzny. Odzysk metotreksatu i jego metabolitu z płynu biologicznego był równy odpowiednio 87 i 80%. Granica wykrywalności obu substancji wynosiła 5 ngmP1 a granica oznaczalności 25 ng ml(-1).

3

High performance liquid chromatography in monitoring of concentrations of total and free etoposide in plasma

Skibińska Ł.

Chemia Analityczna

|

2001

|

Vol. 46, No. 6

849-855

EN

Etoposide is extensively used in anticancer therapy and highly bound (95%) to albumin in human plasma. The monitoring of total and free concentration of this drug could help individualize dosage regimen to improve clinical response and reduce hematological toxicity. A simple HPLC method for quantification of total and free etoposide in plasma is described. The method involves the addition of teniposide as .an internal standard, chloroform extraction and HPLC separation on a reversed phase Nucleosil Phenyl column using metha-nol-water-acetic acid (55:44:1) as a mobile phase. The effluent from the column was monitored at 240 nm. The method is selective, reproducible and sensitive. The detection limit for etoposide was 0.05ug m(-1). The feasibility of this method has been tested in 3 patients with bone marrow transplantation receiving etoposide during intravenous infusion. Any interference was not found from endogenous substances and co-administered with etoposide drugs (amicacin sulphate, ceftazidime, teicoplanin, ciclosporine).

PL

Etopozyd jest szeroko stosowanym lekiem w terapii przeciwnowotworowej w znacznym stopniu wiążącym się z białkami osocza (95%). Monitorowanie całkowitego stężenia eto-pozydu jak również frakcji wolnej leku ma na celu optymalizację terapii, zwiększenie skuteczności jego działania oraz zmniejszenie niepożądanych skutków ubocznych. Opracowano prostą metodę HPLC do oznaczania całkowitego stężenia i wolnej frakcji leku w osoczu stosując tenipozyd jako wzorzec wewnętrzny. Analizę chromatograficzną poprzedzono ekstrakcję leku z próbek biologicznych za pomocą chloroformu a rozdział substancji przeprowadzono na kolumnie Nucleosil Phenyl w odwróconym układzie faz stosując detektor spektrofotometryczny przy długości fali 240 nm. Fazę ruchomą stanowiła mieszanina metanolu, wody i kwasu octowego (55:44: l). Opisana metoda jest czuła, powtarzalna i selektywna. Granica oznaczalności etopozydu wynosiła 0.05ug ml(-1). Metodę sprawdzono oznaczając etopozyd w osoczu 3 chorych, u których przeprowadzono transplantację szpiku kostnego, otrzymujących lek w infuzji dożylnej. Zarówno endogenne substancje jak i leki podawane chorym łącznie z etopozydem (siarczan amikacyny, ceftazydyna, teikoplanina, cy-klosporyna) nie przeszkadzały w oznaczeniach.