Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

50 lat bankowania i sterylizacji radiacyjnej tkanek w Polsce

Kamiński A., Komender J., Michalik J.

Postępy Techniki Jądrowej

|

2013

|

z. 3

13--17

2

Pozyskiwanie osteoblastów ludzkich do badań biomateriałów in vitro

Kudelska-Mazur D., Lewandowska-Szumieł M., Benke G., Kowalski M., Komender J.

Inżynieria Biomateriałów

|

2001

|

R. 4, nr 15-16

51-58

PL

Niniejsza praca przedstawia metodę izolacji i określenia fenotypu osteoblastów ludzkich. Zastosowano zmodyfikowaną metodę izolacji osteoblastów wykorzystującą samorzutnie wydostawanie się komórek z kości. Odpowiednio przygotowane amputowane kawałki kości umieszczono w pożywce w naczyniu hodowlanym. Po upływie ok. 1-2 tygodni obserwowano pojedyncze komórki lub grupy komórek, przylegające do dna naczynia. Jednolitą warstwę osteoblastów uzyskiwano po 2-8 tygodniach. W celu sprawdzenia fenotypu komórek wyizolowanych z kości oznaczono poziom osteokalcyny, aktywność fosfatazy zasadowej - podstawową i w odpowiedzi na dihydroksycholakalciferol, a także zdolność mineralizacji macierzy zewnątrzkomórkowej. Jako kontrolę przy badaniach fenotypu wykorzystano hodowle fibroblastów ludzkich izolowanych z amputowanych śródoperacyjnie fragmentów torebki stawowej.

EN

A method of human osteoblast isolation and evaluation of their phenotype hale been described in his paper. The modified method of isolation using a bone chips culture was employed. Appropriately prepared amputated bone fragments were placed in culture dishes in culture medium. After approximately 1-2 weeks single cells or groups of cells adhering to the bottom of culture dishes were observed. A monolayer of cells was obtained after 2-8 weeks. Osteocalcin level and alkaline phosphatase activity - basal and in reaction to dihydroxycholecalciferol (1,25(OH)2D3) were measured and ability to mineralize extracellular matrix was estimated in order to check the phenotype of cells isolated from bone. Human fibroblasts cultures were isolated from joint fibrous capsule fragments amputated during surgery and served as control cells in osteoblast phenotype investigation.

3

Połączenie dwóch metod testowania biomateriałów in vitro

Kudelska-Mazur D., Lewandowska-Szumieł M., Komender J., Benke G.

Inżynieria Biomateriałów

|

2000

|

R. 3, nr 9

26--29

PL

W pracy przedstawiono połączenie dwóch metod testowania biomateriałów w układzie in vitro. W doświadczeniu wykorzystano osteoblasty i fibroblasty ludzkie otrzymane z hodowli pierwotnych. Komórki wysiano na powierzchnię próbek materiałów: hydroksyapatytu, tlenku glinu i stali chirurgicznej. Zbadano żywotność, liczbę i rozpłaszczenie komórek. Żywotność oznaczono w teście XTT (EL/SA). Komórki poddano znakowaniu barwnikiem fluorescencyjnym Hoechst oraz barwieniu z użyciem przeciwciał anty-a-tubulinie metodą pośrednią. Następnie próbki obserwowano w mikroskopie fluorescencyjnym. Liczbę i rozpłaszczenie komórek zmierzono za pomocą programu do analizy obrazu Image- ProPlus. Wyniki testów żywotności porównano z wynikami pomiarów rozpłaszczenia i liczby komórek. Zauważono korelację pomiędzy rozpłaszczeniem i żywotnością osteoblastów i fibroblastów hodowanych na hydroksyapatycie, tlenku glinu i stali chirurgicznej.

EN

We present a combination of two methods of biomaterial testing in vitro. Primary culture human osteoblasts and fibroblasts seeded on the samples of hydroxyapatite, alumina and surgical steel were used in the experiments. Celt viability, number and spreading were investigated. Viability was estimated in XTT test (ELISA). Anti-a-tubulin antibodies were used for indirect immunofluorescent labelling of cells and Hoechst fluorescent dye for staining of nuclei. Subsequently the samples were observed in a fluorescence microscope. Cell number and spreading were measured by means of Image ProPtus software. The results of viability test were compared with calculations of cell number and spreading, It was observed that correlation existed between spreading and viability of osteoblasts and fibroblasts cultured on hydroxyapatite, alumina and surgical steel.