Przebadano charakterystykę albumin surowicy bydlęcej BSA (bovine serum albumin) poddanych działaniu trzech dienoaldehydów (trans, trans-2,4-heptadienal, trans,trans-2,4-nonadienal i trans,trans-2,4-dekadienal). Utrata grupy aminowej i zwiększenie liczby karbonylowej wskazywały na uszkodzenie łańcucha bocznego BSA. Wyniki elektroforezy przeprowadzonej z wykorzystaniem żelu dodecylosiarczan sodu-poliakryloamid wskazały, że wszystkie stosowane aldehydy doprowadziły do powstania agregatów BSA, przy czym najbardziej znaczący efekt zaobserwowano dla heptadienalu. Zmiany wewnętrznej fluorescencji i hydrofobowości powierzchni BSA wskazywały, że aldehydy zmodyfikowały białkową strukturę BSA. Spowodowały ponadto, że albuminy BSA utworzyły żółtobrązowe addukty i fluorescencyjną lipofuscynę. Addukty heptadienal-BSA wykazywały zwiększoną absorbancję w zakresie UV-Vis 270-280 nm oraz 300-400 nm, podobnie jak oba pozostałe addukty aldehyd-BSA. Zaobserwowano silne korelacje między tworzeniem się grup karbonylowych połączonych z białkami, współczynnikiem retencji zawartości wolnych grup aminowych oraz maksymalną wartością absorpcji UV-Vis a zawartością aldehydów. Przeprowadzono także analizę składu podstawowych produktów utleniania i dokonano oceny wpływu parametrów utleniania na modyfikację BSA. Zaobserwowano większe uszkodzenie BSA podczas działania krótkołańcuchowych aldehydów zastosowanych w większych stężeniach.
EN
Bovine serum albumin (BSA) was incubated with trans, trans-2,4-heptadienal, trans,trans-2,4-nonadienal, and trans, trans-2,4-decadienal (concns. 1-50 mM) at 37°C for 24 h to produce yellowish-brown adducts and fluorescent lipofuscin. Loss of the amino groups and increased carbonyl value of the product were indicative for BSA side chain damage. The Na dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis showed the aggregation of BSA. Changes in intrinsic fluorescence and surface hydrophobicity value of BSA indicated the modification of protein structure. The heptadienal-BSA adducts exhibited an increased UV-Vis absorbance at 270-280 nm and 300-400 nm, similarly to the 2 other aldehyde-BSA adducts. Strong correlations were obsd. between formation of protein-bound carbonyls, the retention ratio of free amino content, max. UV-Vis absorption value, and concn. of aldehydes. Principal component anal. was also performed. In general, the BSA damage increased with increasing the aldehyde concn. and decreasing their chain length.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.