Three-dimensional cell culture used for tissue engineering has its own rules and directions. There is a deficiency of proliferative markers suitable for tissue engineering research when cells are cross-linked in network of fibers or suspended in hydrogel. It limits cell harvesting or impairs the flow to cell area conventional chemicals used as proliferative markers. According to current published data, the expression of replication-dependent histone H3 genes could be novel proliferative marker of cells. The intensive synthesis of H3 histones is tightly correlated with DNA synthesis and H3 mRNA is rapidly degraded when the S phase is completed or inhibited by cell cycle inhibitors. Based on this relation, non-dividing cells contain no H3 mRNA. The aim of the study was to determine expression pattern of replication-dependent H3 subtypes and tissue-specific H3/t subtype in normal human connective tissue cells. Analyzed cellular model was chondrocytes cell line due to the phenomenon that articular cartilage doesn't have natural ability to heal its injuries, consequently development of cartilage engineering is necessary. Evaluation of expression pattern was performed using Reverse Transcription PCR and reaction products were visualized on the gel electrophoresis. This study demonstrated that RT-PCR technique can be successfully used to study the expression of different histone H3 subtypes. Presented electrophoregram showed differential expression of the analyzed subtypes (no expression of H3/g and H3/t subtypes). Incubation with sodium butyrate and quantitative Real Time PCR enabled quantification of mRNA level of selected H3/d subtype. This part of study showed a significant reduction in the mRNA level of H3/d when the sodium butyrate was added. Obtained results indicated the possibility of using the expression of individual histone H3 subtype as a new proliferative marker.
2
Dostęp do pełnego tekstu na zewnętrznej witrynie WWW
W oparciu o wyniki badań pobieranych w okresie półtorarocznym (sierpień 2007-luty 2009) prób osadu czynnego pochodzącego z oczyszczalni „Wschód” w Łaziskach Górnych, podjęto odnalezienie zależności pomiędzy ilością obserwowanych mikroskopowo mikroorganizmów nitkowatych w osadzie a wartością indeksu osadu oraz zawiesin ogólnych i wartością BZT5 w ściekach oczyszczonych. Ponieważ proces puchnięcia osadu czynnego obserwowany był głównie w okresie zimowym analizowano także wpływ temperatury otoczenia i ścieków na ilość mikroorganizmów osadu czynnego. Potwierdzone metodami statystycznymi (test korelacji Pearsona oraz test korelacji rang Spearmana) istotne korelacje pomiędzy liczbą mikroorganizmów nitkowatych a wartościami indeksu osadu, BZT5 i zawiesin ogólnych potwierdziły zasadność i przydatność prowadzenia, obok badań fizyko-chemicznych, stałych badań mikroskopowych osadu czynnego.
EN
Based on results of the research of samples of activated sludge which come from the sewage treatment plant "Wschód" in Łaziska Górne (taken at the period a year and a half long: August 2007 - February 2009) they made an attempt finding the relation of filamentous micro-organisms between the amount observed microscopically in the sludge and with the index value of sludge and total suspensions and the BZT 5 value in wastewater cleaned. Since the process of swelling activated sludge was observed mainly in the winter period also an influence of the ambient temperature and sewers on the quantity of micro-organisms of activated sludge was being analysed. Confirmed with statistical methods (Pearson correlation test and Spearman's rank correlation coefficient) essential correlations between the number of filamentous micro-organisms and index values of activated sludge, BZT 5 and total suspensions confirmed the legitimacy and the usefulness of the lead, besides research of physicochemical, permanent microscopic tests of activated sludge.
Od czasu opracowania techniki fucji komórek tworzenie hybrydom produkujących przeciwciała monoklonalne stało się podstawowym źródłem syntezy wysocespecyficznych cząsteczek immunoglobulin, skierowanych przeciwko wybranemu antygenowi. Przeciwciała monoklonalne wprowadzono zarówno do badań podstawowych, diagnostyki, jak i terapii. Zastosowanie przeciwciał monoklonalnych w terapii wymusiło opracowanie bardziej wyszukanych metod syntezy - zadaniem stało się otrzymanie przeciwciał nie tylko specyficznych, ale maksymalnie zbliżonych strukturą do przeciwciał ludzkich. Tak powstały przeciwciała chimeryczne czy humanizowane, otrzymywane drogą inżynierii genetycznej.
EN
Starting from the day, when cell fusions technique was established, hybridoma cells producing monoclonal antibodies became main source of highly specific immunoglobulin directed against chosen antigen. Recently monoclonal antibodies are introduced into research area, diagnostic and therapy as well. Application of monoclonal antibodies into therapy demands approaching much more sophisicated methods of immunoglobulin synthesis. The aim is synthesis of monoclonal antibodies not only highly specific, but also structurally the closest to the structure of human antibodies. That is how using genetic engineering methods chimeric and humanized monoclonal antibodies were synthesized.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.