A combined solid-phase extraction (SPE) high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed for the separation of the furanochromone fraction and for the determination of visnagin in genetically transformed root cultures of Ammi visnaga and their liquid medium. High and reproducible recovery of visnagin was achieved using Supelclean LC-8 SPE columns for isolation. HPLC analysis was performed en an Eurospher C8 Knauer column. The mobile phase was a 29:28:526:417 (v/v/v/v) mixture of acetonitrile, tetrahydrofuran,30 mmol 1-1 citric acid (pH 3.0), and methanol. Visnagin was identified by diode-array detection and from matrix assisted laser desorption/ionis-ation mass spectrometric (MALDI MS) data. The quantification of visnagin was performed by the external standard method. In contrast to the crude drug, the visnagin content was consistently higher than that of khellin in the transformed root cultures.
PL
Opracowano metodę oddzielania frakcji furanochromonu i oznaczania visnaginu w genetycznie przekształconych kulturach Ammi visnaga i w ich ciekłym środowisku. W metodzie zastosowano ekstrakcję stało-fazową w połączeniu z wysokosprawną, ciekłą chromatografią. Duży odzysk visnaginu uzyskano stosując do rozdzielania kolumnę Superclean LC-8 SPE. Do analizy chromatograficznej użyto kolumny Eurospher C8 Knauer z fazą ruchomą zawierającą acetonitryl, tetrahydrofuran, 30 mmol l(-1) kwas cytrynowy (pH 3,0) i metanol w stosunku objętościowym 29:28:526:417. Do detekcji yisnaginu użyto wielodiodowego detektora oraz spektometrii mas z desorpcją laserem w obecności matrycy (MALDI-MS). Ilościowe oznaczenie visnaginu wykonywano metodą zewnętrznego standardu. W przeciwieństwie do surowego produktu zawartość yisnaginu była znacznie wyższa niż kelinu w przekształconych kulturach korzeni.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.