Wyniki wyszukiwania - BazTech

Ograniczanie wyników

2 Chemia Analityczna

2 2009

Znaleziono wyników: 2

Liczba wyników na stronie

Wyniki wyszukiwania

Wyszukiwano:
w słowach kluczowych: revesed-phase HPLC

Sortuj według:

Ogranicz wyniki do:

Simple HPLC analysis of tocopherols and cholesterol from specimens of animal origin

Czauderna M., Kowalczyk J., Niedźwiedzka K. M.

Chemia Analityczna

2009

Vol. 54, No. 2

203-214

An improved saponification method followed by original isocratic high-performance liquid chromatography (HPLC) with photodiode detection (996 PAD, Waters) and/or fluorescence detection (474 Waters) for simultaneous analysis of cholesterol (CHOL) and δ-, α y-tocopherols (δ-T, α-T and y-T; forms of vitamin E) has been described. The method involved direct saponification of sample solutions flushed with a stream of argon, in the presence of vitamin C, followed by isocratic liquid chromatographic elution (Nova Pak C18column, 4 μm, 300 x 3.9 mm, I.D., Waters) and photodiode detection (UV) at 205 nmand/or fluorescence monitoring (&lambdaex/&lambdaem; = 290/327 nm). Reversed-phase HPLC analyses have revealed that the optimum separation of CHOL and tocopherol from endogenous substances in biological samples can be obtained using the mobile phase containing 17% propan-2-ol and 83% of acetonitrile (v/v) at the flow rate of 1.5 mLmin-1. Applying isocratic elution with UV monitoring at 205 nm and fluorescence detection, 8-T, a-T, y-T and CHOL were eluted after 6.19 š 0.09, 7.01 š 0.08, 7.79 š 0.08 and 14.7 š 0.2 min, respectively.UV detection at 205 nm assured better detector responses for all tocopherols compared to other wavelengths. Detailed investigations have proven that alkaline saponification at 80°C for 15 min followed by isocratic chromatographic elution and UV and fluorescence detection enable simple and satisfactory simultaneous analysis of CHOL and &delta-; α y-tocopherols in specimens of animal origin.

Opisano poprawioną metodę jednoczesnego oznaczania cholesterolu oraz 5-, a- i y-tokoferoli (trzy formy witaminy E). Metoda polega na zmydlaniu próbki i następnie zastosowaniu oryginalnej, izokratycznej, wysokosprawnej chromatografii cieczowej z detekcją wykorzystującą fotodiodę (996 PAD Waters) oraz zdetekcjąfluorescencyjną (474 Waters). Zmydlanie próbki prowadzono w roztworze mieszanym strumieniem argonu w obecności witaminy C. Inne warunki onaczanie: kolumna Nova Pak C18 4 μm, 300 x 3,9 mm I.D., Waters; detekcja w nadfiolecie - 205 nm; fluorescencja:λex/ λem= 290/327 nm. W układzie odwróconych faz najlepsze rozdzielenie otrzymano w przypadku fazy ruchomej o składzie objętościowym: propan-2-ol — 17% i acetonitryl - 83%. Po rozdzieleniu piki δ-, α- i y-tokoferoli oraz chloroform pojawiły się w czasach: 6,19 š 0,09, 7,01 š 0,08, 7,79 š 0,08 and 14,7 š 0,2min. Najlepszą detekcję UV, dla wszystkich tokoferoli, otrzymano przy długości fali 205 nm. Stwierdzono również, że ługowanie alkaliczne w 80°C przez 15 min umożliwia prostą, jednoczesną chromatograficzną analizę tokoferoli w próbkach pochodzenia zwierzęcego.

Development of validation of RP-HPLC method for simultaneous determination of pyridoxine hydrochloride, isoniazid, pyrazinamide and rifampicin in pharmaceutical formulation

Dhal S. K., Sharma R.

Chemia Analityczna

2009

Vol. 54, No. 6

1487-1500

A simple, rapid and precise liquid chromatographic method for simultaneous determination of pyridoxine hydrochloride. isomazid, pyrazmamide and rifampicin in a tablet dosage form has been developed Chromatographic analysis was performed on a 250 x 4.6 mm I.D. C|8 column packed with 5 μm-in-size particles applying gradient elution with a mobile phase composed of acetonitrile (A) and 15 mmol L-1 potassium dihydrogen phosphate buffer of pH adjusted to 4.0 J: 0.1 with o-phosphoric acid (B). A:B ratio was 11:89 v/v for the initial 4.5 min. and then it was maintained at 50:50 v/v; the flow rate was 1 mL min-1UV detection was performed at 235 nm. The total run time was 20 mm. Retention times for pyridoxine hydrochloride, isoniazid, pyrazmamide and rifampicin were 3.687, 4.113, 5.041 and 12.829 min, respectively The method was validated with respect to linearity, accuracy, . precision, specificity and sensitivity in accordance with ICH guidelines. Limits of detection were 0.043. 0.063. 0.036 and 0.059 μg mL--1'and limits of quantification were 0.13, 0.19, 0.11 and 0.18 μg ml, ' for pyridoxine hydrochloride, isoniazid, pyrazinamide and rifampicin, respectively. High recovery and low coefficients of variance confirmed the suitability of the method for the simultaneous analysis of the four considered drugs.

Opracowano prostą, szybką i precyzyjną procedurę jednoczesnego oznaczania chlorowodorku pirydoksyny, izoniazydu, pirazynamidu i rifampicyny w tabletkach za pomocą chromatografii cieczowej. Analizę chromatograficzną prowadzono przy użyciu kolumny 250 x 4,6 mm. napełnionej faząC18 o wielkości cząstek wynoszącej 5 urn. Zastosowano gradient fazy ruchomej składającej się z acetonitrylu (A) i buforu w postaci fosforanu dihydropotasowego o stężeniu 15 mmol L-1 i pH = 4 š 0, l ustalonego za pomocą kwasu o-fosforowego (B). Stosunek A i B wynosił 11:89 v/v przez 45 min, następnie był utrzymywany stosunek 50:50 v/v. Przepływ fazy ruchomej wynosił l mL min"1. Całkowity czas rozdzielania składników mieszaniny wynosił 20 min. Detekcję UV prowadzono przy 235 nm. Czasy retencji chlorowodorku pirydoksyny, izoniazydu, pirazynamidu i rifampicyny wynosiły odpowiednio 3.687; 4,113; 5,041 i 12,829 min. Opracowaną procedurę walidowano uwzględniając liniowość, dokładność, precyzję, specyficzność i czułość, zgodnie z zaleceniami Międzynarodowej Konferencji Harmonizacyjnej (ICH). Wykrywalności wynosiły 0.043; 0.063; 0.036 i 0,059μg mL-1a oznaczalności 0,13; 0,19; 0,11 i 0,18 μg mL-1 odpowiednio dla chlorowodorku pirydoksyny, izoniazydu, pirazynamidu i rifampicyny. Wysoki odzysk i małe współczynniki wariancji potwierdziły przydatność metody do jednoczesnej analizy czterech leków.