Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

Aktywność proteolityczna keratynolitycznych bakterii Stenotrophomonas rhizophila

Jankiewicz U., Miros E., Górska E., Prędecka A., Russel S.

Woda-Środowisko-Obszary Wiejskie

|

2017

|

T. 17, z. 2

103--110

PL

Bakterie keratynolityczne budzą w ostatnich latach zainteresowanie ze względu na ich potencjał aplikacyjny w utylizacji odpadów z przetwórstwa drobiu, a także przemysłu skórzanego i tekstylnego. W procesie keratynolizy biorą udział enzymy proteolityczne, dodatkowo wspomagane aktywnością reduktaz disulfidowych lub obecnością związków redukujących. Dlatego celem badań przedstawionych w niniejszej pracy było oznaczenie aktywności proteolitycznej u bakterii Stenotrophomonas rhizophila, zdolnych do degradacji piór ptasich podczas hodowli na pożywkach płynnych. Po pięciu dniach hodowli bakterie odwirowano, z uzyskanego supernatantu wytrącono białka siarczanem amonu. Na tak uzyskanym preparacie enzymatycznym przeprowadzono badania mające na celu charakterystykę biochemiczną proteazy S. rhizophila. Aktywność proteolityczna była najwyższa w temperaturze 50°C i w pH ok. 11. Proteaza bakterii S. rhizophila należy do metalozależnych proteaz serynowych, co wynika z reakcji z inhibitorami specyficznymi. Silną inhibicję aktywności obserwowano w obecności detergentów: bromku heksadecylotrimetyloamoniowego i Tweenu 80 oraz jonów Pb2+, Zn2+ Cd2+, oraz Fe3+. Jony Ca2+, Mg2+ oraz Ba2+ powodowały wzrost aktywności proteolitycznej badanego szczepu bakterii.

EN

Keratinolytic bacteria arouse interest in recent years because of their potential application in waste from poultry processing and leather industry and textile. In the keratynolysis proteolytic enzymes are involved, in addition to making the disulfide reductase activity or the presence of reducing compounds. Therefore the aim of the research presented in this paper was to determine proteolytic activity in bacteria Stenotrophomonas rhizophila, capable of degrading bird feathers during culture on liquid media. After five days the bacterial cultures were centrifuged, the protein from supernatant was precipitated with ammonium sulfate. On the so obtained enzymatic preparation was carried out research aimed at the biochemical characterization of proteases S. rhizophila. The proteolytic activity was highest at 50°C and at a pH of approx. 12. The protease of S. rhizophila belongs to the metaldependent serine protease, which results from the reaction of specific inhibitors. A strong inhibition of the activity observed in the presence of detergents: CTAB and Tween 80, and Pb2+, Zn2+ Cd2+ and Fe3+. Ions Ca2+, Mg2+and Ba2+ resulted in an increase of proteolytic activity studied strain.

2

Proteolytic activity of Bacillus cereus strains

Nabrdalik M., Grata K., Latała A.

Proceedings of ECOpole

|

2010

|

Vol. 4, No. 2

273--277

EN

The aim of conducted research was to assess proteolytic activity of Bacillus cereus strains, depending on the source of proteins in a growth medium and temperature. Two Bacillus cereus strains: G10 and A96, isolated from soil and water respectively, were applied in the research. The source of carbon in the growth media was provided by the protein substrates as follows: albumin, casein and skimmed milk. The temperature ranged between 30 and 60ºC. The proteolytic activity was determined with the use of a spectrophotometric method with 2% casein as a substrate, at the wavelength λ = 560 nm. In the experiment, the proteolytic activity depended on the type of protein substrate in the growth medium and the temperature. B. cereus G10 strain showed the highest activity at 30ºC in case of albumin and the lowest in the growth medium with skimmed milk. At temperatures 40 and 50ºC the most favourable medium was with an addition of skimmed milk and the least favourable with albumin. Proteolytic activity was not recorded when the temperature was the highest and the medium contained skimmed milk, whereas at the same temperature the lowest activity was noted again in the medium with albumin. Bacillus cereus A96 strain showed, however, different activity. The highest activity was noted at tempertaures of 30 and 50ºC in the medium with skimmed milk, and the lowest in the medium with casein. The opposite was noted at 40ºC, as no proteolytic activity was recorded in the presence of skimmed milk while the highest was recorded in the presence of casein. When analysing the influence of the temperature on the proteolytic activity, it has been noted that strains of Bacillus cereus are the most vigorous at the temperature of 30 and 40ºC, and the least vigorous at 50 and 60ºC. The highest recorded values for the screened strains have been obtained at 30 and 40ºC in the medium with skimmed milk.

PL

Celem podjętych badań była ocena aktywności proteolitycznej szczepów Bacillus cereus w zależności od źródła białka zawartego w podłożu oraz temperatury. Do badań wykorzystano 2 szczepy Bacillus cereus G10 oraz A96 wyizolowane odpowiednio z gleby i wody. Źródłem węgla w pożywkach były substraty białkowe: albumina, kazeina oraz odtłuszczone mleko. Aktywność proteolityczną oznaczono w zakresie temperatur od 30 do 60ºC. Oznaczenia aktywności proteolitycznej przeprowadzono metodą spektrofotometryczną, używając jako substratu 2% kazeiny po 10-minutowej inkubacji, przy długości fali λ = 560 nm. W przeprowadzonym doświadczeniu aktywność proteolityczna uzależniona była od rodzaju substancji białkowej zawartej w podłożu oraz temperatury. I tak, badany szczep B. cereus G10 w temperaturze 30ºC największą aktywność proteolityczną wykazywał w obecności albuminy, a najniższą w obecności odtłuszczonego mleka. W temperaturach 40 i 50ºC najkorzystniejszym podłożem okazało się podłoże zawierające odtłuszczone mleko, a najmniej korzystne zawierające albuminę. W najwyższej temperaturze nie stwierdzono aktywności proteolitycznej w obecności odtłuszczonego mleka, zaś najniższą aktywność odnotowano ponownie w środowisku albuminy. Z kolei drugi z badanych szczepów, Bacillus cereus A96, charakteryzował się odmienną aktywnością. W temperaturach 30 i 50ºC najwyższą aktywność proteolityczną odnotowano w podłożu zawierającym odtłuszczone mleko, a najniższą w środowisku kazeiny. Natomiast w temperaturze 40ºC zaobserwowano odwrotną sytuację, gdyż nie stwierdzono aktywności proteolitycznej w obecności odtłuszczonego mleka, a najwyższą aktywność uzyskano w obecności kazeiny. Analizując wpływ temperatury na aktywność proteolityczną, stwierdzono, iż największą aktywność badane szczepy Bacillus cereus wykazują w temperaturach 30 i 40ºC, a najmniejszą w 50 i 60ºC. Najwyższe wartości dla badanych szczepów uzyskano w temperaturach 30 i 40ºC na podłożu z dodatkiem odtłuszczonego mleka.

3

Evaluation of proteolytic activity of Bacillus mycoides strains

Grata K., Nabrdalik M., Latała A.

Proceedings of ECOpole

|

2010

|

Vol. 4, No. 2

253--256

EN

The research has focused on evaluation the capability of Bacillus mycoides strain isolated from soil (designated as A134) and from water (designated as G3) to secrete proteolytic enzymes. The effect of temperatures (30÷60ºC) and medium composition (albumin, casein, skim milk) on protease production was evaluated. The proteolytic activity was determined by using the spectrophotometric method and expressed as amounts of µmol tyrosine liberated by 1 cm3 crude enzyme. In conducted research, the amount of tyrosine depended on the temperature, medium formulation and strain of Bacillus mycoides. It was found that milk and albumin media were proved to be best for protease production by soil strain A134 at 30ºC (14.00 and 13.72 µmol of tyrosine, respectively), while casein medium at 60ºC (11.44 µmol). Strain B. mycoides isolated from water G3 behaved differently from strain A134. The best temperature for enzyme production was 60ºC but milk and albumin media (16.2 and 17.0 µmol, respectively), whereas 30ºC on casein medium. Moreover, it was observed that this strain did not exhibit any enzyme expression on casein medium at 50 and 60ºC.

PL

Celem badań była ocena potencjalnej zdolności proteolitycznej szczepu Bacillus mycoides A134 wyizolowanego z gleby i szczepu G3 wyizolowanego z wody. Oceniono wpływ temperatury (30÷60ºC) i składu podłoża zawierającego albuminę, kazeinę lub odtłuszczone mleko na aktywność proteolityczną. Oznaczenie aktywności proteolitycznej przeprowadzono metodą spektrofotometryczną, a wyniki podano jako ilość uwolnionych mikromoli tyrozyny. W przeprowadzonym doświadczeniu ilość mikromoli tyrozyny uzależniona była od temperatury i składu podłoża, a także szczepu. Stwierdzono, że Bacillus mycoides A134 uwolnił największą ilość w temperaturze 30°C na podłożach z mlekiem odtłuszczonym lub albuminą (14,00 oraz 13,72 µmoli tyrozyny, odpowiednio), natomiast w 60ºC na podłożu z kazeiną (11,44 µmol). W porównaniu do niego szczep wyizolowany z wody G3 wykazywał odmienną aktywność. Największą ilość mikromoli tyrozyny stwierdzono w temperaturze 60ºC na podłożach z mlekiem lub albuminą (16,2 oraz 17,0 µmoli odpowiednio), a 30°C na podłożu z kazeiną. Ponadto nie stwierdzono żadnej aktywności proteolitycznej na podłożu z kazeiną w 50 i 60ºC.

4

Evaluation of the enzymatic activity of selected bacterial strains

Wierzba S., Latała A.

Polish Journal of Chemical Technology

|

2007

|

Vol. 9, nr 2

68-72

EN

In these studies we attempted to evaluate the lipolytic, proteolytic and cellulolytic activity of bacterial strains isolated from water and the bottom sediments of Turawa Lake. The following bacterial genera prevailed among the isolated strains: Bacillus, Pseudomonas, Enterobacter, Cellulomonas and Cytophaga. The lipolytic activity was determined using a titrimetric method, the proteolytic activity - using a modified Anson method, and the cellulolytic activity - on the basis of mass decrement of a cellulose disk after 14 days of bacterial culture. The cultures were maintained at 28°C, pH 7.0 with the following substrates: olive oil, albumin and cellulose disk. Among the analysed microorganisms, Bacillus and Pseudomonas strains showed the highest lipolytic and proteolytic activity. In the cellulolytic assay Cytophaga bacteria showed about twofold higher activity than that of Celulomonas.

5

Effect of medium salinity with sodium chloride (NaCl), sodium nitrate (NaN03) and their compound on the enzymatic activity of selected soil fungi. Part 1. Protein hydrolysis

Przybulewska K., Wieczorek A.

Chemia i Inżynieria Ekologiczna

|

2007

|

Vol. 14, nr 11

1197-2202

EN

This paper presents the results of research work referring to the effect of medium salinity with sodium chloride (NaCl), sodium nitrate (NaNO3) and their mixture on the proteolytic activity of soil fungi. All genera of isolated fungi hydrolysed the protein found in medium with high intensity, with the exception of Fusarium sp. and Trichoderma sp. This was manifested by the formation of hydrolysis zones, surpassing considerably the colony limits. Medium salinity affected the growth and the proteolytic activity of analyzed fungi, depending on a dose and type of salt, as well as on the respective strain. The increase in salt concentration in medium reduced the growth of surface mycelium, affecting at the same time protelytic activity stimulation.

PL

Przedstawiono wyniki badań dotyczące wpływu zasolenia podłoża chlorkiem sodu (NaCl), azotanem sodu (NaNO3) i ich mieszaniną na aktywność proteolityczną grzybów glebowych. Wszystkie rodzaje wyizolowanych grzybów z wyjątkiem Fusarium sp. oraz Trichoderma sp. hydrolizowały białko obecne w podłożu z dużą intensywnością. Uwidaczniało się to tworzeniem stref hydrolizy wykraczających znacznie poza obręb kolonii. Zasolenie podłoża wpływało na wzrost i aktywność proteolityczną testowanych grzybów zależnie od dawki i rodzaju soli, a także od poszczególnych szczepów. Wzrost stężenia soli w podłożu ograniczał wzrost grzybni powierzchniowej wpływając jednocześnie na stymulację aktywności proteolitycznej.