Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

Techniki chromatograficzne stosowane w oczyszczaniu białek. Cz. 1, Izolacja i wstępne frakcjonowanie białek

Błaszczyk U.

Laboratorium - Przegląd Ogólnopolski

|

2009

|

nr 7-8

42--45

PL

Izolacja i oczyszczanie są niezbędnymi etapami na drodze do poznania struktury, sposobu działania czy funkcji biologicznej badanego białka. Rozwój technik chromatograficznych wykorzystywanych w separacji biocząsteczek przyczynił się do postępu w biochemii i biotechnologii. W celu uzyskania pożądanego poziomu czystości produktu końcowego, większość procedur oczyszczania składa się kilku etapów.

EN

Protein isolation and purification are essential steps to the characteristics of the structure, mode of action and biological function of the protein of interest. The development of chromatographic techniques used in biomolecule separation has contributed to the advances made in biochemistry and biotechnology. Most purification procedures require more than one step to achieve the desired level of the final product purity.

2

Techniki chromatograficzne stosowane w oczyszczaniu białek. Cz. 1, Przegląd metod chromatograficznych

Błaszczyk U.

Laboratorium - Przegląd Ogólnopolski

|

2009

|

nr 9

50--54

PL

Cząsteczki białkowe mogą być rozdzielane na podstawie różnic w ich specyficznych właściwościach, takich jak: ładunek, rozmiar, hydrofobowość lub zdolność do swoistego wiązania określonych ligandów. Artykuł prezentuje krótki przegląd metod chromatograficznych stosowanych w procesie oczyszczania białek.

EN

Protein molecules can be separated on the basis of differences in their specific properties such as charge, size, hydrophobicity or their ability to bind specific ligands. The article presents a brief overview of chromatographic methods used in the process of protein purification.

3

Wykorzystanie chromatografii z unieruchomionym jonem metalu do izolowania białek

Wójcik M., Koziołkiewicz M.

Wiadomości Chemiczne

|

2003

|

[Z] 57, 1-2

99--113

EN

Immobilized metal affinity chromatography (IMAC) is a widely used technique for separation of proteins with natural surface-exposed histidine residues and recombinant proteins with polyhistidine fusion tags in particular [1-7]. IMAC is a type of an affinity chromatography which gives an opportunity to separate proteins based on the binding of proteins to transition metals. This occurs via the electron-donating side chain of residues such as histidine and cysteine, which substitute water molecules coordinated to the metal. Due to the fact that metal affinity is sensitive to the exposure and spatial arrangement of histidine residues, IMAC can probe structural changes expressed on protein surfaces as a result of partial digestion, unfolding, or association with other molecules [8]. Overall, IMAC is a quick method which limits the number of procedures in the process of puryfing proteins thereby reducing the cost of their isolation. This paper describes influence of the type and the number of electro-donor surface groups, the type of metal immobilized with the stationary phase and pH of the mobile phase on the selectivity of an affinity separation.

4

Oczyszczanie białek z zastosowaniem chromatografii oddziaływań hydrofobowych, cz. I

Wójcik M., Koziołkiewicz M.

Analityka : nauka i praktyka

|

2003

|

nr 1

21--25

5

Akrylamidowe pochodne skrobi w układach dwufazowych służących do oczyszczania białek. Cz. I. Synteza, właściwości i diagramy fazowe

Brzozowski Z., Pietruszka N., Galaey I., Mattiasson B.

Polimery

|

2000

|

T. 45, nr 9

623-630

PL

Przedmiotem badań były dwuskładnikowe mieszaniny polimerowe tworzące w środowisku wodnym układy dwufazowe. Jednym ze składników (P) mieszaniny był glikol polioksyetylenowy o ciężarze cząsteczkowym 10 000 (PEG 10 000) lub kopolimer winyloimidazol/winylokaprolaktam (VI/VCL), drugim zaś (Q) akryloamidowa pochodna skrobi (APS) albo handlowy dekstran ("Dextran T70") stosowany jako polimer wzorcowy. Kopolimery VI/VCL różniły się składem (tabela 2), zaś APS - zawartością akryloamidu (tabela 1). Wyznaczono diagramy fazowe szeregu takich mieszanin (rys. 2-9), określając zakresy stężeń składników P i Q warunkujące powstawanie układów dwufazowych. Ustalono, że wprowadzenie 0,5-proc. roztworu NaCl pozwala na wyraźne zmniejszenie tych stężeń. Stwierdzono także, że wzrost hy-drofilowości kopolimerów VI/VCL spowodowany zwiększeniem w nich zawartości VI utrudnia, a często uniemożliwia otrzymanie układu dwufazowego (por. rys. 8 i 9). Wyniki badań wskazują, że APS stanowią dobre zamienniki kosztownego dekstranu i mogą być z powodzeniem zastosowane jako składniki układów dwufazowych służących do oczyszczania białek.

EN

Summary - Binary polymer mixtures, forming two-phase aqueous systems, were studied. One component (P) was either polyoxyethylene glycol (PEG 10 000) or vinylimidazole/vinylcaprolactam copolymer (VI/VCL); the other component (Q) was an acrylamide starch derivative (APS) or a commercial dextran (Dextran T70) which was used as a standard polymer. The VI/VCL copolymers had varying compositions (Table 2) and the APS had varying acrylamide contents (Table 1). Phase diagrams were determined for a series of P-Q mixtures (Figs. 2-9) and the P and Q content ranges were established at which two-phase systems were formed. With aqueous 0.5% NaCl added, the composition ranges were found to have narrowed. The growth of hydrophilic VI/VCL copolymers caused by increased content of VI was found to render a two-phase system difficult or even impossible to form (Figs. 8, 9). The APS were found to present efficient substitutes for expensive dextran and they can be used as two-phase system components to purify proteins.