Mitochondria są organellami znajdującymi się w prawie każdej komórce organizmu ludzkiego. Odpowiadają przede wszystkim za syntezę ATP, a więc dostarczają energię dla wszystkich procesów wewnątrzkomórkowych. Wraz z rozwojem medycyny wzrosła świadomość o bardzo ważnej roli tych organelli zarówno w życiu, jak i w śmierci komórki. Diagnozowanie schorzeń o podłożu zaburzeń w prawidłowym funkcjonowaniu mitochondriów świadczy o bardzo ważnych funkcjach mitochondrium. Dziedziczenie mitochondrialne nie jest zgodne z prawami Mendla, mitochandria przekazywane są głównie od matki.
EN
Mitochondria are organelles found in almost every cell of the human body. They are primarily responsible for the synthesis of ATP and thus provide energy for all intracellular processes. Along with the development of medicine, the awareness of a very important role of these organelles in both cell life and death increases. Diagnosing diseases related to disorders in the proper functioning of mitochondria is indicative of very important functions of the mitochondrion. Mitochondrial inheritance is not accordant with the Mendelian laws, mitochondria are passed mainly from the mother.
Individual plant extracts from horse chestnut, arnica and hops have been applied in vitro on Jurkat type leukemic cells from which mitochondria were isolated. Each sample of the isolated experimental mitochondria were monitored by the determination of proteins and by monitoring the fluorescence of endogenous fluorophores of experimental mitochondria compared with control mitochondria isolated from intact leukemic cells by means of the synchronous fluorescence fingerprint method. The horizontal cut of excitation-emission matrices at (λ = 240 nm) demonstrated the final graphical and mathematical fluorescence of mitochondria. The result is the presence of two fluorescent excitation-emission zones (the result of the overlapping effect of very similar fluorescence maxima values), which were subsequently compared with standard fluorophores. A reduction of protein content in all experimental mitochondria was observed, the most after the effect of arnica and the least after the influence of horse chestnut. The decrease of fluorescence of the first fluorescent zone was compared to control mitochondria. The decline of mitochondrial fluorescence confirmed the cytotoxic effect of the substances studied on the mitochondria in vitro.
PL
Oceniono wpływ in vitro wyciągów wybranych roślin (kasztanowiec, chmiel, arnica) na mitochondria wyizolowane z nowotworowych komórek białaczkowych typu Jurkat. Każdą próbkę wyizolowanych eksperymentalnie mitochondriów monitorowano określając produkowane białka i oceniając fluorescencję endogennych fluoroforów z użyciem metody the synchronous fluorescence fingerprint i porównano z mitochondriami kontrolnymi uzyskanymi z komórek nie poddanych oddziaływaniu wyciągów. Odczyty wskazań emisji macierzy falą o długości (λ = 240 nm) ukazały fluorescencję mitochondriów. Stwierdzono dwie emisje, które porównano ze standardowymi fluorophorami. Zobrazowano redukcję zawartości białka we wszystkich doświadczalnych mitochondriach, największą po wyciągach z arnica i najmniejszą po kasztanowcu. Obniżenie fluorescencji pierwszej strefy było porównywalne z mitochondriami kontrolnymi. Obniżenie mitochondrialnej fluorescencji potwierdza cytotoksyczny efekt badanych substancji na mitochondia in vitro.
D-Lactate dehydrogenase (cytochrome) was isolated from baker´s yeasts (Saccharomyces cerevisiae) using fast protein liquid chromatography. Mitochondria from disrupted cells were separated and enzymes released by Triton X-100. Purification was performed by fast protein liquid chromatography on hydroxylapatite and in another separate experiment on AH-Sepharose with covalently bound 4-hydroxy-acyanocinnamic acid (SHCA). Although purification on hydroxylapatite provided approachable samples with activities for only D-lactic acid, chromatography on SHCA seemed to be better because a purified fraction of enzyme with the specific activity of 3.38 nkat/mg was obtained. Another problem considered was the usefulness of the combination of chromatography on hydroxylapatite and SHCA providing a fraction of D-lactic acid with specific activity of 5.71 nkat/mg and no cross reactivity for L-lactic acid.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.