Development of organic micro- and nanocrystals is rapidly expanding field due to their potential use in new technology devices in the field of chemistry and life science. Two methods of organic crystals preparation for future modification with polysaccharides used for cancer detection are compared in the paper. Both reprecipitation methods allow one to obtain microcrystals with a similar size range. However, the use of microfluidic system and polysaccharides solution reduces aggregates formation and leads to obtain narrow size distribution crystals.
PL
Rozwój metod otrzymywana organicznych mikro-i nanokryształów wynika z ich potencjalnego zastosowania w obszarze nowych technologii, chemii i nauk przyrodniczych. W pracy porównano dwie metody otrzymywania kryształów dla przyszłych modyfikacji polisacharydami w celu wykrywania nowotworów. Obie proponowane metody umożliwiają uzyskanie mikrokryształów o zbliżonym rozkładzie wielkości. Zastosowanie mikroukładu i roztworu polisacharydu zmniejsza liczbę powstających agregatów i prowadzi do uzyskania kryształów o wąskim rozkładzie średnic.
In this paper, we present cytotoxicity analysis (determination of lactate dehydrogenase — LDH activity performed in a designed and fabricated microfl uidic system. This method allowed for analysis of a supernatant collected from A549 (human lung cancer) and HT-29 (human colon cancer epithelial) cells, which were incubated for 24 h with selected compounds. LDH is an intracellular enzyme present in tissues, which is released into the supernatant caused by membrane damage or cell lyses. In our tests, LDH-Cytotoxicity Assay Kit (BioVision) was used. The toxic eff ect of drugs was measured in the developed microsystem made of PDMS (poly(dimethylsiloxane)). Analytical reaction took place in the special designed microchannel geometry. Then, the LDH activity was measured at 490 nm using spectrophotometer. In subsequent experiments, appropriate conditions for measurements using a microfl uidic system were chosen. It was found that the selected reagent is sensitive to temperature changes and light exposure. Reaction time in the microsystem was determined by changes of fl ow rates of reagents. Afterwards, for the various reaction time, the toxic eff ect of 5-fl uorouracil, celecoxib and 1,4-dioxane was performed. The obtained results were compared with the results carried out in 96-well plates. Based on these results, it was noted that the enzymatic reaction time in the microsystem is shorter than in 96-well plate. Moreover, the advantage of using microsystem is also the small amount of reagents.
A rapidly growing pharmaceutical industry requires faster and more efficient ways to find and test new drugs. One of the new method for cell culture and examining the toxic effects of drugs is application of microfluidic systems. They provide new types of microenvironments and new methods for investigation of anticancer therapy. The use of microsystems is a solution that gives the opportunity to reduce not only cost and time, but also a number of tests on animals. In this paper we present designed and fabricated hybrid microfluidic systems which are applicable for cell culture, cell based cytotoxicity assays and photodynamic therapy procedures. Polydimethylsiloxane (PDMS) and sodium glass were used for fabrication of microdevices. The designed geometry of the microdevices includes cell culture microchambers and a concentration gradient generator (CGG). The CGG enables to obtain diff erent concentrations of tested drugs in a single step, which is a significant simplification of cytotoxicity assay procedure. In the designed microsystems three various cell lines (normal and carcinoma) were cultured and analyzed.
4
Dostęp do pełnego tekstu na zewnętrznej witrynie WWW
W niniejszym artykule zaprezentowano układ mikroprzepływowy do amperometrycznego oznaczania stężenia kwasu L-askorbinowego. Podczas projektowania układu wykorzystano symulacje komputerowe, wykonane za pomocą oprogramowania COMSOL. Do wytworzenia układu zastosowano różne technologie m.in.: głębokie plazmowe trawienie krzemu w procesie Boscha, polimeryzację plazmową, miękką litografię z zastosowaniem krzemowej matrycy i elastomeru PDMS, fotolitografię UV, magnetronowe katodowe napylanie cienkich warstw metalicznych, technikę lift-off, oraz modyfikację elektrochemiczną powierzchni elektrod. W projektowanym układzie do testu immunoenzymatycznego ELISA z wykorzystaniem fosfatazy alkalicznej jako markera, kwas askorbinowy będzie końcowym produktem reakcji enzymatycznej, którego oznaczanie służy do określania w sposób pośredni stężenia istotnych w diagnostyce medycznej agalitów takich jak białko C-reaktywne, fibrynogen i troponiny.
EN
In this paper, a microfluidic system for L-ascorbic acid concentration measurement using the amperometric detection method is presented. The system was developed basing on computer simulations obtained with software COMSOL. Different technologies and techniques such as: deep silicon plasma etching in Bosch method, plasma polymerization, soft lithography with Si template and elastomer PDMS, UV lithography, magnetron sputtering, lift-off and electrochemical surface modification were applied. L-ascorbic acid is electrochemically active compound. In the designed system for immunoenzymatic test ELISA with alkaline phosphatase as an enzymatic label, this compound is a final product of enzymatic reaction. It allows indirect electrochemical measurement of concentration of electrochemically inactive analytes, important in medical diagnostics, such as: C-reactive protein, fibrinogen or troponins.
CRP jest białkiem ostrej fazy i jednym z najlepszych niespecyficznych markerów określającym ryzyko oraz zaawansowanie choroby niedokrwiennej serca. Bardzo przydatne stają się w tym przypadku wielofunkcyjne urządzenia diagnostyczne z szybką amperometryczną detekcją oraz funkcją wstępnego rozdziału próbki. Układy mikroprzepływowe umożliwiają taki rozdział przy małej objętości badanych próbek i reagentów, co znacząco obniża koszty testu. Z wyjątkiem nowych aptaczujników, jedynie immunoczujniki zapewniają specyficzność wobec poszukiwanego analitu w próbce. W nieprzezroczystych próbkach, jakimi są płyny fizjologiczne, niemożliwe jest zastosowanie optycznych metod detekcji, stąd konieczne jest zastosowanie metody znakowania enzymem przeciwciał w immunoczujnikach i użycie innego rodzaju detekcji np. elektrochemicznej. Ze względu na niski poziom szumów tła i możliwość szybkiej detekcji, najczęściej stosuje się detekcję amperometryczną. Celem naszych prac jest opracowanie amperometrycznych immunoczujników mikroprzepływowych do diagnostyki medycznej do oznaczania CRP.
EN
CRP is acute phase protein and one of the best nonspecific diagnostic markers in heart diseases. Microfluidic systems offer function of preliminary probe separation with small consumption of probes and reagents, which decrease cost of unit test. Except newly developed aptasensors, only immunosensors provide specificity to determined analit in composed analyzed probe. In the case of nontransparent samples, like physiological fluids, immunosensors with electrochemical detection are sensors of choice, e.g. amperometric. For electrochemical detection enzyme labeled antibody is used. In order to decrease background noise and obtain fast response, amperometric sensors are mostly applied. An aim of our research is development of microfluidic type amperometric immunosensors for medical diagnostics, in particular for CRP determination.
Zaprezentowano wyniki badań nad opracowaniem nowej technologii wykonywania niebondowanych przepływowych mikroukładów chemicznych. Z filmu kapilarnego w procesie fotolitografii wykonano matryce. Zostały one użyte w procesie odlewania do wykonania nowego typu niebondowanego mikroukładu. Niebondowane mikroukłady wykonano przez zatopienie w strukturze polimeru matrycy z emulsji filmu kapilarnego. Po usieciowaniu polimeru emulsję usunięto z jego struktury pozostawiając sieć mikrokanatów.
EN
The paper presents results of developing of a new technology for fabrication of bonding-less (B-Less) microfluidic chemical systems. The matrixes for the microsystem preparation were made of a capilla film. They were used in a moulding process for a fabrication of B-Le: microsystem. For the fabrication of B-Less microsystem an emulsk of a capillary film was moulded inside of a polymer block. After p lymer crosslinking the emulsion was removed from the block and the microchannels were formed.
7
Dostęp do pełnego tekstu na zewnętrznej witrynie WWW
In this work a simple and fast method of phosphates determination involving molybdenum blue has been presented. The procedure was adapted for microfluidic system under optimised experimental conditions (flow rate, temperature, wavelength). Moreover, a useful technology for the fabrication of microfluidic equipment has been proposed. Variously shaped microchannel structures were made of poly(methylmetacrylate) (PMMA) or poly(dimethylsiloxane) (PDMS) plates finely engraved with a laser beam. PDMS wafers, after their superficial oxidation in oxygen plasma, were used for sealing the channel structure. The microfluidic module outlet was connected to a Z-shape spectrophotometric flow cell used for optical detection.
PL
W artykule przedstawiono szybką i prostą metodę oznaczania jonów fosforanowych(V), opartą na reakcji tworzenia błękitu molibdenowego. Procedura analityczna została dostosowana do zaprojektowanego przez autorów mikroukładu, w którym przed właściwymi oznaczeniami przeprowadzono szereg pomiarów w celu optymalizacji parametrów eksperymentalnych, takich jak szybkość przepływu medium przez mikroukład, temperatura mikro-reaktora, długość fali. W pracy zaproponowano również technologię wykonania mikroukładów polimerowych. Struktury mikrokanatów w płytkach z polimetakrylanu metylu (PMMA) oraz polidimetylosiloksanu (PDMS) wykonano przez grawerowanie laserowe. Mikroukład uszczelniono poprzez trwałe zespolenie dwóch płytek polimerowych, których powierzchnie poddano działaniu plazmy utleniającej. Detekcję prowadzono w zaprojektowanej przez autorów spektrofotometrycznej kuwecie przepływowej, przystosowanej do pomiarów z wykorzystaniem światłowodów.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.