Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

Immunosensors for human cardiac troponins and CRP, in particular amperometric cTnI immunosensor

Kazimierczak B., Pijanowska D. G., Baraniecka A., Dawgul M., Kruk J., Torbicz W.

Biocybernetics and Biomedical Engineering

|

2016

|

Vol. 36, no. 1

29--41

EN

In this paper, the review of immunosensors for selected cardiovascular disease markers: human cardiac troponins and human C-reactive protein (CRP) is presented. In particular, (cTnI) amperometric immunosensor for cTnI measurements in the concentration range useful in medical diagnostics, based on the developed earlier human CRP amperometric immunosensor, is described. The human cTnI is recommended as one of specific myocardial damage biomarkers, and is considered as the ‘‘gold standard’’, whereas the human CRP is used as the powerful, nonspecific, supplementary biomarker of cardiovascular disease. Carbon, graphite and platinum pastes, used for fabrication of our immunosensor working electrode (WE), were investigated. In the developed simple measuring procedure, based on a direct solid phase enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), for the first time ascorbic acid monophosphate was used for cTnI detection as a substrate in enzymatic reaction of alkaline phosphatase labelling antibodies. Disposable amperometric graphite immunosen- sors, made on polyester film by means of microdispensing robot, suitable for determination of cTnI in the concentration range 0–35 μg/L with the sensitivity 0.67 μA/(μg/L) and linear correlation coefficient 0.91 were obtained.

2

Zastosowanie bezpośredniego testu ELISA do amperometrycznego oznaczania białka C-reaktywnego

Kazimierczak B., Baraniecka A., Pijanowska D.

Przegląd Elektrotechniczny

|

2010

|

R. 86, nr 10

47-49

PL

W immunoczujniku do oznaczania CRP zastosowano procedur. opart. na bezpo.rednim te.cie ELISA, z u.yciem przeciwcia. anty-CRP znakowanych fosfataz. alkaliczn. oraz monofosforanu kwasu askorbinowego - substratu reakcji enzymatycznej. Badania woltamperometryczne przeprowadzono w zminiaturyzowanej celce na sitodrukowanych trojelektrodowych czujnikach w.glowych z chlorosrebrow. elektrod. referencyjn.. Czu.o.. opracowanych czujnikow w zakresie st..e. CRP do 12 mg/L (norma dla m..czyzn polskich laboratoriow analitycznych) wynosi.a 0,57 �ĘA/mg/L (r2 = 0,998).

EN

C-reactive protein (CRP) is acute phase serum protein and serves as a very sensitive, nonspecific marker and predictor of cardiovascular events. The amperometric immunosensor for human CRP is based on a direct ELISA test with anti-CRP antibodies labeled with alkaline phosphatase and ascorbic acid phosphate as an substrate for the enzyme. Voltamperometric measurements were performed with screen-printed 3-electrode amperometric sensors, where counter and working electrodes were made of carbon pastes, and a reference electrode was electrochemically chlorinated silver/silver chloride one. The obtained sensor sensitivity calculated for the CRP concentration range up 12 mg/L (cut-off value for men used in Polish analytical laboratories) was 0,57 ěA/mg/L and linear correlation coefficient of 0,998.

3

Zastosowanie technik immunoenzymatycznych i mikrofluidycznych do amperometrycznego oznaczania stężenia białka C-reaktywnego

Baraniecka A., Kazimierczak B., Kruk J., Pijanowska D. G., Torbicz W.

Elektronika : konstrukcje, technologie, zastosowania

|

2009

|

Vol. 50, nr 11

79-83

PL

CRP jest białkiem ostrej fazy i jednym z najlepszych niespecyficznych markerów określającym ryzyko oraz zaawansowanie choroby niedokrwiennej serca. Bardzo przydatne stają się w tym przypadku wielofunkcyjne urządzenia diagnostyczne z szybką amperometryczną detekcją oraz funkcją wstępnego rozdziału próbki. Układy mikroprzepływowe umożliwiają taki rozdział przy małej objętości badanych próbek i reagentów, co znacząco obniża koszty testu. Z wyjątkiem nowych aptaczujników, jedynie immunoczujniki zapewniają specyficzność wobec poszukiwanego analitu w próbce. W nieprzezroczystych próbkach, jakimi są płyny fizjologiczne, niemożliwe jest zastosowanie optycznych metod detekcji, stąd konieczne jest zastosowanie metody znakowania enzymem przeciwciał w immunoczujnikach i użycie innego rodzaju detekcji np. elektrochemicznej. Ze względu na niski poziom szumów tła i możliwość szybkiej detekcji, najczęściej stosuje się detekcję amperometryczną. Celem naszych prac jest opracowanie amperometrycznych immunoczujników mikroprzepływowych do diagnostyki medycznej do oznaczania CRP.

EN

CRP is acute phase protein and one of the best nonspecific diagnostic markers in heart diseases. Microfluidic systems offer function of preliminary probe separation with small consumption of probes and reagents, which decrease cost of unit test. Except newly developed aptasensors, only immunosensors provide specificity to determined analit in composed analyzed probe. In the case of nontransparent samples, like physiological fluids, immunosensors with electrochemical detection are sensors of choice, e.g. amperometric. For electrochemical detection enzyme labeled antibody is used. In order to decrease background noise and obtain fast response, amperometric sensors are mostly applied. An aim of our research is development of microfluidic type amperometric immunosensors for medical diagnostics, in particular for CRP determination.

4

Mikroprzepływowe immunoczujniki z detekcją amperometryczną

Baraniecka A., Górska M., Zaborowski M., Prokaryn P., Szczypiński R., Skwara K., Szmigiel D., Sierakowski A., Nieprzecki M.

Elektronika : konstrukcje, technologie, zastosowania

|

2009

|

Vol. 50, nr 12

100-106

PL

Artykuł obejmuje przekrój zagadnień związanych z mikroprzepływowymi amperometrycznymi immunoczujnikami. Wymienione zostały przykładowe technologie i materiały konstrukcyjne używane do budowy mikroprzepływowych modułów i elektrod oraz immunoenzymatyczne metody analityczne stosowane w immunoczujnikach, takie jak ELISA i ELISPOT. Zostały również przedstawione zagadnienia związane z przepływem w systemach mikroprzepływowych. Opisano technologię matryc z SU-8, struktur mikroprzepływowych wykonanych z PDMS-u oraz laminowanych elektrod Au/Ti na podłożu polimerowym. Uzyskano szczelne mikroprzepływowe układy ze złotymi elektrodami na podłożu z PDMS. Dzięki zastosowaniu trawienia jonowego podłoża przed napyleniem warstw metali oraz zastosowaniu pośredniej warstwy tytanowej, elektrody wykazują dobrą adhezję do podłoża. Dodatkowo została zastosowana warstwa PDMS-u, chroniąca ścieżki metalizacji przed pękaniem, w której plazmowo wytworzono okienka kontaktów elektrycznych i elektrod aktywnych elektrochemicznie. Elektrody charakteryzowały się małą rezystancją elektryczną, choć nie uzyskano zadawalającej powtarzalności ich wykonania. Struktury mikroprzepływowe wraz z elektrodami mogą być zastosowane w amperometrycznym immunoczujniku do pomiaru różnych antygenów, w zależności od użytych immunoreagentów m.in. do pomiaru stężenia fibrynogenu we krwi, w celu określenia ryzyka wystąpienia udaru niedokrwiennego mózgu oraz chorób układu krążenia.

EN

This paper describes some problems related with microfluidic amperometric immunosensors. It contains brief review of technology and constructive materials for microfluidic systems and electrodes. In addition, immunoenzymatic analytical methods like: ELISA and ELISPOT as well as some flow phenomena in microfluidic environment are presented. Polymeric SU-8 masters, PDMS-based microfluidic structures and laminated Au/Ti electrodes on polymeric substrates were fabricated. The microfluidic structures were successfully bonded after oxygen plasma surface activation. Thanks to applying reactive ion etching prior Au sputtering and Ti adhesive layer deposition, the Au/Ti electrodes exhibited a very good adhesion. After patterning, the electrodes were protected by a thin PDMS layer. Openings for electrodes and electrical contact pads were etched by (SF₆ + O₂) plasma. The electrodes had a good electrical conductivity but rather poor reproducibility. The microfluidic structures can be applied in amperometric immunosensor to measure concentration of different antigens e.g. concentration of fibrinogen in blood for evaluation of brain stroke and cardiovascular diseases risk.

5

Wpływ gliadyny na organizm ludzki oraz próba oznaczania jej stężenia w badanych próbkach

Kazimierczak B., Baraniecka A., Pijanowska D., Torbicz W.

Acta Bio-Optica et Informatica Medica. Inżynieria Biomedyczna

|

2001

|

Vol. 7, nr 1-2

37-42

PL

Podjęto próby zastosowania reakcji redukcji nadtlenku wodoru, katalizowanej przez peroksydazę chrzanową, podczas pomiaru stężenia gliadyny w próbkach otrzymanych dwiema metodami: w roztworze zawierającym 50% alkoholu etylowego (dla pośredniego testu ELISA na membranach nitrocelulozowych) oraz dimetylosulfotlenku (dla kompetycyjnego testu ELISA z matrycami poliakrylonitrylowymi). Omówiono prawidłowe przygotowanie próbek gliadyny, sposób jej immobilizacji na membranach i w matrycach oraz optymalizację warunków zastosowanej reakcji chemicznej. Miało to na celu opracowanie immunoczujnika gliadyny, który mógłby zastąpić tradycyjny test ELISA wymagający specjalistycznego sprzętu i wykwalifikowanego personelu.

EN

The aim of this work was to obtain gliadin specificity sensor, based on ELISA test scheme, which would utilise horseradish peroxidase catalysed hydrogen peroxide reduction, for pH shift as a function of the gliadin sample concentration. We received gliadin samples by two methods using 50% ethyl alcohol (for indirect ELISA test on nitrocellulose membranes) and dimethylsulfoxide (for competitive ELISA test on poliakrylonitryl matrices). The work was devoted to proper preparation of samples, their immobilisation on membranes or polymeric matrices and optimisation of applied chemical reaction. We tried to elaborate model of immunosensor enabling to measure gliadin concentration without the use of special equipment and trained staff.