Wyniki wyszukiwania - BazTech

1

Fast separation and detection of main components in complex raw biological materials using temperature-controlled planar micro-chromatography (micro-TLC)

Zarzycki P. K., Ślączka M. M., Zarzycka M. B., Włodarczyk E., Baran M. J., Heese T., Głód B. K.

Pomiary Automatyka Kontrola

|

2010

|

R. 56, nr 4

360-364

EN

This paper is a continuation of our previous research focusing on development of micro-TLC methodology. The main goal of present paper is to demonstrate the separation and detection capability of micro-TLC technique involving simple analytical protocols without multi-steps sample pre-purification. In present studies components of interest were isolated from biological samples including fish bile and spirulina cells. Described methodology can be applied for fast fractionation or screening of target substances as well as chemo-taxonomic studies and fingerprinting of complex mixtures, which are present in raw biological or environmental samples.

PL

Chromatografia cienkowarstwowa jest powszechnie wykorzystywaną metodą analityczną stosowaną w rozdzielaniu substancji obecnych w złożonych próbkach biologicznych, środowiskowych oraz preparatach farmaceutycznych. Związane jest to głównie z prostotą sprzętu, możliwością jednoczesnej analizy wielu próbek w trakcie jednego procesu analitycznego. Dodatkowo, istotna jest możliwość bezpośredniego analizowania złożonych próbek bez ich wstępnego oczyszczenia. Obecna publikacja jest kontynuacją badań dotyczących zastosowania mikrochromatografii planarnej prowadzonej w warunkach kontrolowanej temperatury (rys. 1). W szczególności, w pracy wykazano potencjał analityczny mikrochromatografii planarnej w rozdzielaniu złożonych próbek, bez potrzeby ich uprzedniego wieloetapowego oczyszczania.Jako materiały badane wykorzystano spirulinę oraz żółć rybią (rys. 2 - 4). Wykazano, iż detekcja analitów może być znacząco poprawiona poprzez umieszczenie uprzednio rozwiniętych płytek chromatograficznych w parach jodu lub poprzez wybarwienie plamek odczynnikiem wywołującym (kwasem fosforomolibdenowym). Niskocząsteczkowe substancje z próbek środowiskowych (wody z jezior, ścieki surowe oraz oczyszczone) były zatężane przy pomocy ekstrakcji do fazy stałej. Badania wykazały obecność szeregu pasm na mikrochromatogramach cienkowarstwowych, które są specyficzne dla poszczególnych ekosystemów wodnych Pomorza Środkowego. Opisana metodologia może znaleźć zastosowanie w szybkim frakcjonowaniu oraz oznaczaniu ilościowym substancji niskocząsteczkowych pochodzących ze złożonych materiałów biologicznych, jak również w badaniach przesiewowych dużej ilości próbek środowiskowych (rys. 5 - 8).

2

Oszacowanie ilości pasm możliwych do rozdzielenia na mikropłytkach TLC w procesie rozwijania jedno oraz dwukierunkowego próbek wieloskładnikowych

Zarzycki P. K., Zarzycka M. B., Głód B. K.

Pomiary Automatyka Kontrola

|

2009

|

R. 55, nr 4

276-279

PL

Chromatografia cienkowarstwowa (TLC) jest prostą i wydajną metodą analityczną powszechnie wykorzystywaną do rozdzielania oraz oznaczeń ilościowych szerokiej gamy substancji, obecnych w złożonych próbkach biologicznych, środowiskowych oraz preparatach farmaceutycznych. Główną zaletą TLC jest możliwość prostej detekcji rozdzielonych substancji przy pomocy bezpośredniej obserwacji płytki w świetle widzialnym lub fluorescencji plamek, uwidaczniającej się przy naświetleniu płytki promieniowaniem elektromagnetycznym z zakresu UV. Efektywne rozdzielenie mieszanin wieloskładnikowych może być uzyskane przy użyciu płytek o wymiarze nie przekraczającym 5 cm wzdłuż drogi rozwijania fazy ruchomej. Dzięki temu uzyskuje się znaczące skrócenie czasu analizy oraz polepszenie warunków detekcji do badań ilościowych. Nasze badania wskazują, że na płytce HPTLC typu RP o wymiarach 5 x 5 cm możliwe jest rozdzielenie ponad 240 plamek chromatograficznych, w trybie rozdzielania dwukierunkowego. W szczególności podano szereg przykładów rozdzielania jedno oraz dwukierunkowego mieszanin wieloskładnikowych wzorców sterydów, fulerenów, preparatów farmaceutycznych oraz ekstraktów barwników spiruliny.

EN

Thin-layer chromatography (TLC) is still commonly used as a simple and efficient tool for separation and quantification of several analytes which are present in complex pharmaceutical, biological, and environmental samples. The main advantage of TLC is that the bands or spots detected can be easily inspected under visible and UV light conditions and then digitalized using simple office scanners. In analytical practice, modern high-performance-thin-layer chromatography (HPTLC) involving a reversed phase (RP) plate is particularly suitable for efficient separation and sensitive pharmaceutical formulations. It is noteworthy that when using HPTLC plates, the mobile phase developing distance can be reduced to less than 50 mm. This conclusion is based on the observation that the minimum values of the plate height (H) can be achieved if the solvent migration distance along the HPTLC plate ranges from 30 to 40 mm. Under such conditions the total analysis time can be dramatically reduced in comparison to chromatographic separations performed on typical 10 or 20 cm long TLC plates. In this work there is estimated the micro-TLC plate peak capacity using one and two dimentional development performed in a temperature controlled, micro-TLC chamber (Fig. 1). The peak capacity estimation was based on the recorded densitometric profiles of HPTLC plates obtained from real samples, separated under 1D and 2D conditions, including: testosterone and its derivatives mixture (Figs. 2 and 3), the Azucalen herbs extract (Fig. 4), water and organic liquids extracts of the Spirulina maxima dyes (Fig. 5) as well as of C60 and C70 fullerenes mixture (Fig. 6). The experimental data show that micro-TLC plate working under 2D development protocol is capable of separation of more than 240 spots. It is also proved that this method can be useful for fast fingerprinting of complex biological mixtures.

3

Determination of aluminium in dialysates and human serum by flow injection analysis and liquid chromatography with fluorimetric detection

Kokot Z., Pawlaczyk J.

Chemia Analityczna

|

1998

|

Vol. 43, No. 2

215-224

EN

A flow injection analysis and ion chromatography - fluorimetric method is described for the determination of aluminum in dialysates and body fluids, based on its complexation with 8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid (HQS) in the presence of hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB). In the flow injection analysis the fluorimetric reagent consisted of HQS (0.003 mol 1(-1) and CTAB (0,004 mol l(-l) in acetate buffer pH = 5.15, at a flow rate 0.5 ml min(-1). Ion chromatography was performed using Dionex CG2 cation exchange guard column and potassium sulfate (0.1 mol l(-1), pH = 3.0) as a mobile phase. Serum protein separation was achieved using Superdex 200 HR l0/30 column and phosphate buffer as an eluent. There was a good agreement between the values obtained by this method and graphite furnace atomic absorption spectrometry.

PL

Opracowano wstrzykowo-przepływową metodę oznaczania glinu w płynach dializacyjnych i surowicy, opartą na reakcji kompleksowania glinu z kwasem 8-hydroksychino lino-5-sulfonowym (HQS) w obecności bromku heksadecylo-trimetylo amoniowego (CTAB). Fluorymetryczny odczynnik składał się z HQS (0,003 mol l(-1) i CTAB (0,Q04 mol 1(-1) w buforze octanowym o pH = 5, I5; szybko jego dodawania wynoszą 0,5 ml min(- 1). Rozdział jonów metali metodą jonowymiennej chromatografii cieczowej przeprowadzono na kolumnie kationowej Dionex CG2 stosując siarczan potasu (0,1 moi l(-l), pH = 3,0) jako fazę ruchomą. Rozdział białek surowicy krwi przeprowadzono na kolumnie Superdex 200 HR 10/30 oraz wykorzystując bufor fosforanowy jako fazę rozwijającą. Uzyskano dobrą zgodność pomiędzy wynikami oznaczeń glinu metodą przedstawioną w pracy a wynikami uzyskanymi metodą atomowej spektrometrü absorpcyjnej z atomizacją w kuwecie grafitowej.