A novel fluorescence system for determination of hemoglobin (Hb) is presented. It is based on the Hb-catalyzed oxidation of nonfluoroscent thiamine to fluorescent thiochrome by H(2)O(2) in basic medium. The enzymatic reaction at room temperature was studied by measuring the increase in fluorescence intensity of thiochrome at 440 nm in order to obtain the initial reaction rate. The initial reaction rate was linear with Hb concentration in the range of l.0 x 10(-7)-2.0 x 10(-10) mol L(-1) and the limit of detection was 4.6 x 10(-11) mol L(-1). The method is simple, sensitive and reliable for the determination of Hb and has been successfully applied to the determination of Hb in human urine.
PL
Przedstawiono nową, fluorescencyjną metodę oznaczania hemoglobiny (Hb). Podstawą metody jest reakcja utleniania tiaminy (nie wykazującej fluorescencji) do tiochromu (wykazującego fluorescencję). Reakcja ta, zachodząca pod wpływem H(2)O(2) w środowisku alkalicznym, jest enzymatycznie katalizowana przez Hb. W celu wyznaczenia początkowej szybkości reakcji badano ją w temperaturze pokojowej mierząc wzrost natężenia fluorescencji tiochromu przy długości fali 440 nm. Początkowa szybkość reakcji rosła ze wzrostem stężenia Hb w zakresie l x 10(-7)-2 x 10(-10) mol L(-1), a granica detekcji wynosiła 4.6 x 10(-11) mol L(-1). Opracowana metoda oznaczania Hb jest prosta, czuła i wiarygodna. Zastosowano jaz powodzeniem do oznaczania Hb w moczu ludzkim.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.