Wyniki wyszukiwania - BazTech

Ograniczanie wyników

1 Chemia Analityczna

1 2005

Znaleziono wyników: 1

Liczba wyników na stronie

Wyniki wyszukiwania

Wyszukiwano:
w słowach kluczowych: 7-hydroxymethotrexate

Sortuj według:

Ogranicz wyniki do:

HPLC determination of methotrexate and its metabolites in blood plasma

Skibińska Ł., Gregorczyk J., Jarmołowicz A.

Chemia Analityczna

2005

Vol. 50, No. 3

551-560

Methotrexate (MTX) and its main metabolites: 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino- -N10-methyIpteroic acid were simultaneously determined by HPLC method in human plasma sample. They were isolated from the matrix applying a solid-phase extraction procedure on a Bakerbound SPE C18 column. The mean percentage recovery was 79.0, 86.9 and 85% for methotrexate, 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino-N10-methylptreroic acid, respectively. Chromatographic separation of the analytes was performed on the reversed-phase C18 column and isocratic elution with the phosphate buffer (pH 6.5) containing 7% of acetonitrile, 2% of N,N-dimethylformamide and 0.2% of 30% hydrogen peroxide was applied. p-Aminoacetophenone served as the interna! standard. At the outlet of the column the eluent was irradiated by with UV light of 254 nm to convert the analytes to their fluorescent derivatives. The excitation and emission wavelenghts were 350 and 436 nm, respectively. Quantitation limit of the investigated compounds was 0.075 ug mL-1.

Opracowano metodę wysokosprawnej chromatografii cieczowej do oznaczania metotrek-satu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino-N10-metyloptero iłowego w osoczu pacjentów. Ekstrakcję metotreksatu i jego metabolitów z płynu biologicznego przeprowadzono na fazie stałej w kolumnie Bakerbound SPE C18. Średnia wydajność ekstrakcji wynosiła 79,0, 86,9 i 85% dla metotreksatu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino -N10-rnetylopteroilowego. Rozdział chromatograficzny przeprowadzono na kolumnie RP-C|sub>18. Fazę ruchomą stanowił bufor fosforanowy (pH 6,5) zawierający 7% acetonitrylu, 2%N,N-dimery loformamidu oraz 0,2% wody utlenionej (30%). Jako wzorzec wewnętrzny zastosowano p-aminoacetofenon. Wypływający z kolumny eluent naświetlano promieniowaniem UV o długości fali λ = 254 nm w celu otrzymania fluorescencyjnych pochodnych badanych analitów. Zastosowano detekcję spektrofiuorymetryczną przy długości fali promieniowania wzbudzającego 350 nm i emitowanego 436 nm. Granica oznaczalności dla analizowanych związków wynosiła 0,075 ng mL-1.