Dobór metod analitycznych do monitorowania procesu enzymatycznej hydrolizy białek

• Autorzy: Labus K. , Niesobska A. , Trusek-Hołownia A.

Warianty tytułu

EN

Selection of analytical methods for monitoring of enzymatic hydrolysis of proteins

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

W ramach badań sprawdzono efektywność spektrofotometrycznej metody OPA, wysokosprawnej chromatografii cieczowej typu SE-HPLC oraz klasycznej filtracji żelowej do monitorowania procesu enzymatycznej hydrolizy białekk na przykładzie albuminy serum. Wyniki wskazują, że metoda OPA umożliwia szybkie wstępne oszacowanie postępu proteolizy, SE-HPLC jest niezbędna do ilościowej analizy produktów hydrolizy różniących się masą cząsteczkową, a klasyczna filtracja żelowa umożliwia rozdział mieszaniny poreakcyjnej z wyodrębnieniem frakcji zawierającej produkty o pożądanym zakresie mas cząsteczkowych.

EN

In this study the effectiveness of spectrophotometric OPA method, size exclusion HPLC (SE-HPLC) and classic gel filtration were examined in case of monitoring the enzymatic hydrolysis of proteins. Research was performed on the example of serum albumin. The results indicate that OPA method enables the preliminary estimation of proteolysis progress in a short time period. The SE-HPLC is essential for the quantitative analysis of hydrolysis products with different molecular weight. In turn, gel filtration allows the separation of hydrolysate into fractions with desired range of molecular weights.

Słowa kluczowe

PL

enzymatyczna hydroliza białek; metoda OPA; SE-HPLC; filtracja żelowa

EN

enzymatic hydrolysis of proteins; OPA method; gel filtration; SE-HPLC

• Wydawca: Stowarzyszenie Inżynierów i Techników Mechaników Polskich
• Czasopismo: Inżynieria i Aparatura Chemiczna
• Rocznik: 2015
• Tom: Nr 4
• Strony: 170--171
• Opis fizyczny: Bibliogr. 7 poz., rys.

Twórcy

autor

Labus K.

• Zakład Inżynierii Bioprocesowej i Biomedycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Wrocławska, Wrocław

autor

Niesobska A.

• Zakład Inżynierii Bioprocesowej i Biomedycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Wrocławska, Wrocław

autor

Trusek-Hołownia A.

• Zakład Inżynierii Bioprocesowej i Biomedycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Wrocławska, Wrocław

Bibliografia

• 1. Irvine G.B., 1997. Size-exclusion high-performance liquid chromatography of peptides: a review. Anal. Chim. Acta, 352, 387-397. DOI: 10.1016/S0003- 2670(97)00322-X
• 2. Margot A., Flaschel E., Renken A., 1994. Continuous monitoring of enzymatic whey protein hydrolysis. Correlation of base consumption with soluble nitrogen content. Process Biochem., 29, 257-262. DOI: 10.1016/0032-9592(94)80066-9
• 3. Morais H.A., Silvestre M.P.C., Silva V.D.M., Silva M.R., Silva A.C.S., Silveira J.N., 2013. Correlation between the degree of hydrolysis and the peptide profile of whey protein concentrate hydrolysates: effect of the enzyme type and reaction time. Am. J. Food Technol., 8, 1-16. DOI: 10.3923/ajft.2013.1.16
• 4. Nielsen P.M., Petersen D., Dambmann C., 2001. Improved method for determining food protein degree of hydrolysis. J. Food Sci., 66, 642-646. DOI: 10.1111/j.1365-2621.2001.tb04614.x
• 5. Spellman D., McEvoy E., O’Cuinn G., FitzGerald R.J., 2003. Proteinase and exopeptidase hydrolysis of whey protein: Comparison of the TNBS, OPA and pH stat methods for quantification of degree of hydrolysis. Int. Dairy J., 13, 447-453. DOI: 10.1016/S0958-6946(03)00053-0
• 6. Trusek-Holownia A., Noworyta A., 2015. A model of kinetics of the enzymatic hydrolysis of biopolymers – a concept for determination of hydrolysate composition. Chem. Eng. Proc., 89, 54-61. DOI: 10.1016/j.cep. 2015.01.008
• 7. Yang Y., Boysen R.I., Chowdhury J., Alam A., Hearn M.T.W., 2015. Analysis of peptides and protein digests by reversed phase high performance liquid chromatography–electrospray ionisation mass spectrometry using neutral pH elution conditions. Anal. Chim. Acta, 872, 84-94. DOI: 10.1016/j.aca.2015.02.055