Chromatografia oddziaływań hydrofilowych - HILIC/NH2 - w rozdzielaniu mono i disacharydów oraz badaniu cukrowych frakcji eluatu z rozdzielania składników serwatki mleka

• Autorzy: Głazowska J. , Kamiński M.

Warianty tytułu

EN

Hydrophilic interaction chromatography – HILIC/NH2 –in separation of mono, disaccharides and sugar fractions from whey

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Wysokosprawna chromatografia oddziaływań hydrofilowych - HILIC-HPLC, to alternatywne - w stosunku do warunków faz odwróconych RP-HPLC - warunki rozdzielania polarnych, rozpuszczalnych w wodzie składników mieszanin. Wykorzystywanie w warunkach HILIC jednocześnie kilku mechanizmów rozdzielenia, umożliwia rozdzielenie mieszanin polarnych składników, trudnych, albo niemożliwych do rozdzielania w warunkach RP, w tym, mono i disacharydów. Praca dotyczy badań nad określeniem optymalnych warunków rozdzielania wybranych mono i disacharydów w warunkach HILIC, z zastosowaniem kolumn HPLC z fazą stacjonarną typu NH2, na bazie żelu krzemionkowego i eluentów będących mieszaninami acetonitrylu oraz wody. Przedstawiono możliwość i wyniki rozdzielania mieszanin cukrów redukujących i nieredukujących. Stwierdzono rozdzielanie poszczególnych anomerów cukrów redukujących - zależnie od warunków separacji. Wykonane badania pozwoliły też na zaproponowanie metodyki oznaczania laktozy i glukozy we frakcjach eluatu z preparatywnego rozdzielania składników serwatki mleka.

EN

High performance hydrophilic interaction chromatography - HILIC-HPLC is an alternative technique - to the conditions of reverse phase chromatography (RP-HPLC) - for the separation of polar, water-soluble components of complex mixtures. This technique uses several mechanisms of separation what allows the separation of mixtures of polar components which are difficult or impossible to separate under RP, including mono- and disaccharides. This work relates to studies on determining the optimum conditions for the separation of mono- and disaccharides the selected conditions HILIC, using an HPLC column the amino-type stationary phase, based on silica gel and mobile phases which are mixtures of acetonitrile and water. The possibility of separating sugar mixtures and non-reducing sugars is shown as well as the separation of the individual anomers of reducing sugars - depending on the conditions of separation. The presented studies propose a methodology of determination of lactose and glucose in the fractions eluted from the preparative separation of milk whey components.

Słowa kluczowe

PL

HILIC; rozdzielanie mono i disacharydów; serwatka mleka; rozkład składników; segregacja cząstek; kontrola składu i czystości frakcji eluatu

EN

HILIC; mono- and disaccharides; distribution of components; separation of whey components; control of composition and the quality of sugar fractions

• Wydawca: Publishing House of Siedlce University of Natural Sciences and Humanities
• Czasopismo: Camera Separatoria
• Rocznik: 2014
• Tom: Vol. 6, No. 1
• Strony: 11--21
• Opis fizyczny: Bibliogr. 17 poz., tab., wykr.

Twórcy

autor

Głazowska J.

• Katedra Inżynierii Chemicznej i Procesowej, Wydział Chemiczny Politechnika Gdańska, ul. Gabriela Narutowicza 11/12 80-233 Gdańsk

autor

Kamiński M.

• Katedra Inżynierii Chemicznej i Procesowej, Wydział Chemiczny Politechnika Gdańska, ul. Gabriela Narutowicza 11/12 80-233 Gdańsk

Bibliografia

• [1] A. Kołodziejczyk, Naturalne związki organiczne, ang. Natural organic compounds, PWN, Warszawa 2004
• [2] J. Król, A. Brodziak, A. Litwińczyk, Podstawowy skład chemiczny i zwartość wybranych białek serwatkowych w mleku krów różnych ras i serwatce podpuszczkowej, ang. Basic chemical composition and content of selected whey proteins in milk from different cow breeds and in rennet whey, Żywność. Nauka, Technologia, Jakość, 77 (2011) 74.
• [3] Z. El-Rassi, Carbohydrate analysis by modern chromatography and electrophoresis, Elsevier 2002.
• [4] I. Molnár-Perl, Simultaneous quantitation of acids and sugars by chromatography: gas or highperformance liquid chromatography?, J. Chromatogr. A, 845 (1999) 181.
• [5] B. S. Mason, H. T. Slover, A gas chromatographic method for the determination of sugars in foods, J. Agric. Food Chem., 19 (1971) 551.
• [6] J. Lopez Hernandez, M.J. González-Castro, I. Naya Alba, C. de la Cruz Garcia, High-Performace Liquid Chromatographic determination of mono- and oligosaccharides in vegetables with evaporative lightscattering detection and refractive index detection, J. Chromatogr. Sci., 36 (1998) 293.
• [7] Q. Shenga, X. Suc, X. Lib, Y. Kea, X. Liang, A dextran-bonded stationary phase for saccharide separation, J. Chromatogr. Sci. A, 1345 (2014) 57.
• [8] T. Ikegami, K. Tomomatsu, H. Takubo, K. Horie, N. Tanaka, Separation efficiencies in hydrophilic interaction chromatography, J. Chromatogr. Sci. A, 1184 (2008) 474.
• [9] J.C. Linden, C.L. Lawhead, Liquid chromatography of saccharides, J. Chromatogr., 105 (1975) 125.
• [10] A. J. Alpert, Hydrophilic-interaction chromatography for the separation of peptides, nucleic acids and other polar compounds, J. Chromatogr. A, 499 (1990) 177.
• [11] P. Hemstrom, K. Irgum, Hydrophilic interaction chromatography, J. Sep. Sci., 29 (2006) 1784.
• [12] Q. Fu, T. Liang, Z. Li, Z. Xu, Y. Ke, Y. Jin, X. Liang, Separation of carbohydrates using hydrophilic interaction liquid chromatography, Carbohydrate Res., 379 (2013) 13.
• [13] Q. Fu, T. Liang, X. Zhang, Y. Du, Z. Guo, X. Liang, Carbohydrate separation by hydrophilic interaction liquid chromatography on a ‘click’ maltose column, Carbohydrate Res., 345 (2010) 2690.
• [14] T. Ikegami, K. Horie, N. Saad, K. Hosoya, O. Fiehn, N. Tanaka, Highly efficient analysis of underivatized carbohydrates using monolithic-silica-based capillary hydrophilic interaction (HILIC) HPLC, Anal. Bioanal. Chem., 391 (2008) 2533.
• [15] A. Alpert, M. Shukla, A. Shukla, L. Zieske, S. Yuen, M. Ferguson, A. Mehler, M. Pauly, R. Orlando, Hydrophilic-interaction chromatography of complex carbohydrates, J. Chromatogr. A, 676 (1994) 191.
• [16] P. Jandera, Stationary and mobile phases in hydrophilic interaction chromatography: a review, Anal. Chim. Acta, 692 (2012) 1.
• [17] B. Buszewski, S. Noga, Hydrophylic Interaction liquid chromatography (HILIC) – a powerful separation technique, Anal. Bioanal. Chem., 402 (2012) 231.