Fast and highly sensitive spectrophotometric determination of protein in urine applying novel spectrum probe

• Autorzy: Wei Q. , Li Y. , Wang S. , Li Z. , Du B.

Warianty tytułu

PL

Szybkie i wysokoczułe spektrofotometryczne oznaczanie białka w moczu z zastosowaniem nowego typu wskaźnika spektralnego

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Molybdenurn(Vl)-trimethoxyphenylfluorone (TM-PF) complex has been used in spectro-photometric determination of protein in urine. At pH 2.43 and in the presence of Triton X-100 microemuision protein binds the complex within 2 min, which results in a maximum decrease of its absorbance at 527 nm. The presence of Triton X-100 microemuision significantly improves the sensitivity of the determination. The calibration plots for bovine serum albumin (BS A) and human serum albumin (HSA) were linear up to the analyte concentration of 11 μg mL^-1> and 25 μgg ml^-1>, respectively, with the corresponding molar coefficients of 1.13 x 10^7> L mol^-1> cm^-1> and 7.48 x 10^6> L mol^-1> cm^-1>. The proposed method is simple, practical, and relatively free from interference of coexisting substances, as well as much more sensitive than the Bradford method. Recovery of protein from human urine equals 96.7%-108% and the relative standard deviation is lower than 3.9%. The molar ratio method and the Rosenthanl graphic method have been employed to estimate the binding number and association constant of bovine serum albumin with the complex.

PL

Do oznaczania białek w moczu zastosowano kompleks molibdenu(Vl) z trimetoksyfenyloflu-oronem, do którego białko przyłącza się w ciągu 2 min przy pH 2.43 i \\ obecności Tritonu X-100. Największy spadek absorbancji następuje przy 527 nm. Obecność Tritonu X-100 znacznie poprawia czuiość oznaczania. Krzywe kalibrowania w pr/.ypadku albumin BSA i HAS były liniowe w zakresie, odpowiednio: do 11 μg mL^-1> i 25 μg mL^-1>, a współczynniki molowe absorbancji wynosiły 1,13 x 10^7> i 7,48 x I0^6> L mol^-1> cm^-1>. Zaproponowana metoda jest prosta, praktyczna i stosunkowo wolna od wpływu współobecnych substancji. Jest również bardziej czulą niż metoda Bradford'a. Odzysk białka/ moczu ludzkiego wynosił96.7-108 %. a względne odchylenie standardowe było mniejsze niż 3,9%. Do wyznaczenia stechiometrii tworzonych ukiadów i ich staiych trwałości zastosowano metodę stosunków molowych i graficzna metodę Rosenthanl'a.

Słowa kluczowe

EN

protein; trimethoxyphenylfluorone-Mo(IV) complex; microemulsion; spectrum probe; spectrophotometry

PL

białko; kompleks trimetoksyfenylofluoron-Mo(IV); spektrofotometria; mikroemulsja

• Wydawca: Komitet Chemii Analitycznej PAN
• Czasopismo: Chemia Analityczna
• Rocznik: 2006
• Tom: Vol. 51, No. 1
• Strony: 159--171
• Opis fizyczny: Bibliogr. 34 poz.

Twórcy

autor

Wei Q.

autor

Li Y.

autor

Wang S.

autor

Li Z.

autor

Du B.

• School of Chemistry and Chemical Engineering, Jinan University, Jinan 250022, P. R. China Fax: [phone],

Bibliografia

• 1.Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. and Randall R.J., J. Biol. Chem., 193,265 (1951).
• 2.Bradford M.M.. Anal. Biochem., 72. 248 (1976).
• 3.Zor T. and Selinger Z., Anal. Biochem., 236 (2), 302 (1996).
• 4.Flores R„ Anal. Biochem., 88, 605 (1978).
• 5.Rodkey F.L., C//a Chem., 11,478 (1965).
• 6.Hu Q.L., Zhao F.L. and Li K.A., Chem. Lett.. 13 (1), 71 (2002).
• 7.Guo Z.X. and Shen H.X., Analyst, 124, 1093 (1999).
• 8.Zhu K„ Li K.A. and Tong S.Y., Anal. Lett., 29 (4), 575 (1996).
• 9.Zhang X.W., Zhao F.L. and Li K.A., Microchem., 68, 53 (2001).
• 10.Li D.H., Yang H.H., Zhen H., Fang Y., Zhu Q.Z. and XuJ.G., Anal. Chim. Acta., 401 (1-2), 185 (1999).
• 11.Kessler M.A., Meinitzer A. and Wolfbeis O.S., Anal. Biochem., 248 (1), 180 (1997).
• 12.Zhang X.W., Li K.A. and Zhao F.L., Microchem.. 68 (1), 53 (2001).
• 13.Tsukagoshi K., Okumura Y., Akasaka H.,Nakajima R. and Hara T., Anal. Sci., 12, 525 (1996).
• 14.Sun W., Jiao K. and Liu X.Y., Fenxi Huaxue., 30 (3), 312 (2002).
• 15.Zhao Y.K., Chang W.B. and Ci Y.X., Talanta, 59 (3), 477 (2003).
• 16.Zhong H., Zhao F.L. and Li K.A., Anal. Lett., 35 (4), 701 (2001).
• 17.Wang Y.T., Zhao F.L. and Tong S.Y., Anal. Chem., 364 (6), 560 (1999).
• 18.Fujita Y., Mori I. and Kitano S., Bunseki Kagaku., 32, E379 (1983).
• 19.Fujita Y., Mori 1. and Kitano S., Chem. Pharm. Bull., 32 (10), 4161 (1984).
• 20.Fujita Y., Mori T., Ikuta K., Nakahashi Y., Kato K. and Nakahanishi T., Chem. Pharm. Bull.,37 (9), 2452 (1989).
• 21.Fujita Y., Mori I. and Toyoda M., Anal. Sci., 8 (5), 693 (1992).
• 22.Yu Y., Huang F.D. and Gao Q., Anal. Chem., 299 (1), 1205 (2001).
• 23.Guo Z.X. and Shen H.X., Anal. Chim. Acta, 396, 88 (1999).
• 24.Mori I., Taguchi K., Fujita Y. and Matsuo T., Anal .Lett., 28 (2), 225 (1995).
• 25.Saito Y., Kanetsuna A., Okuda H., Mifune M., Odo J. and Tanaka Y., Chem. Pharm. Bull., 34 (2), 746 (1986).
• 26.Tang G.N., Wei W. and Wang B.N., Fenxi Huaxue, 21 (7), 831 (1993).
• 27.Du B., Wei Q., Wang S.R. and Yu W.L., Talanta, 44 (10), 1803 (1997).
• 28.Du B. and Wei Q., Talanta, 45 (5), 957 (1998).
• 29.Du B., Yang J.H., Wei Q. and Chang G.H., Anal. Lett., 35 (5), 895 (2002).
• 30.Wei Q., Yang J.H., Zhang Y., Chang G.H. and Du B., Talanta, 58 (3), 419(2002).
• 31.Wei Q., Yan L.G., Chang G.H. and Ou Q.Y, Talanta, 59 (2), 253(2003).
• 32.Wei Q. and Du B., Talanta, 45 (5), 957(1998).
• 33.Li Z.J., Pan J.M. and Tang J., Anal. Chim. Acta. 445 (2), 153 (2001).
• 34.Rosenthanl H.R., Anal. Biochem., 20, 525 (1967).