HPLC determination of methotrexate and its metabolites in blood plasma

• Autorzy: Skibińska Ł. , Gregorczyk J. , Jarmołowicz A.

Warianty tytułu

PL

Oznaczanie metotreksatu i jego metabolitów w osoczu krwi metodą HPLC

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Methotrexate (MTX) and its main metabolites: 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino- -N¹⁰-methyIpteroic acid were simultaneously determined by HPLC method in human plasma sample. They were isolated from the matrix applying a solid-phase extraction procedure on a Bakerbound SPE C₁₈ column. The mean percentage recovery was 79.0, 86.9 and 85% for methotrexate, 7-hydroxymethotrexate and 2,4-diamino-N¹⁰-methylptreroic acid, respectively. Chromatographic separation of the analytes was performed on the reversed-phase C₁₈ column and isocratic elution with the phosphate buffer (pH 6.5) containing 7% of acetonitrile, 2% of N,N-dimethylformamide and 0.2% of 30% hydrogen peroxide was applied. p-Aminoacetophenone served as the interna! standard. At the outlet of the column the eluent was irradiated by with UV light of 254 nm to convert the analytes to their fluorescent derivatives. The excitation and emission wavelenghts were 350 and 436 nm, respectively. Quantitation limit of the investigated compounds was 0.075 ug mL^-1.

PL

Opracowano metodę wysokosprawnej chromatografii cieczowej do oznaczania metotrek-satu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino-N¹⁰-metyloptero iłowego w osoczu pacjentów. Ekstrakcję metotreksatu i jego metabolitów z płynu biologicznego przeprowadzono na fazie stałej w kolumnie Bakerbound SPE C₁₈. Średnia wydajność ekstrakcji wynosiła 79,0, 86,9 i 85% dla metotreksatu, 7-hydroksymetotreksatu i kwasu 2,4-diamino -N¹⁰-rnetylopteroilowego. Rozdział chromatograficzny przeprowadzono na kolumnie RP-C|sub>18. Fazę ruchomą stanowił bufor fosforanowy (pH 6,5) zawierający 7% acetonitrylu, 2%N,N-dimery loformamidu oraz 0,2% wody utlenionej (30%). Jako wzorzec wewnętrzny zastosowano p-aminoacetofenon. Wypływający z kolumny eluent naświetlano promieniowaniem UV o długości fali λ = 254 nm w celu otrzymania fluorescencyjnych pochodnych badanych analitów. Zastosowano detekcję spektrofiuorymetryczną przy długości fali promieniowania wzbudzającego 350 nm i emitowanego 436 nm. Granica oznaczalności dla analizowanych związków wynosiła 0,075 ng mL^-1.

Słowa kluczowe

EN

methotrexate; 7-hydroxymethotrexate; 2,4-diamino-N¹⁰-methylpteroic acid; photochemical reactor; RP HPLC

PL

metotreksat; 7-hydroksymetotreksat; kwas 2,4-diaminometyloptoreilowy; reaktor fotochemiczny; chromatografia cieczowa wysokosprawna

• Wydawca: Komitet Chemii Analitycznej PAN
• Czasopismo: Chemia Analityczna
• Rocznik: 2005
• Tom: Vol. 50, No. 3
• Strony: 551--560
• Opis fizyczny: Bibliogr. 12 poz.

Twórcy

autor

Skibińska Ł.

• Department of Physical Pharmacy and Pharmacokinetics, K. Marcinkowski University of Medical Sciences, ul. Święcickiego 6, 60-781 Poznań

autor

Gregorczyk J.

• Department of Physical Pharmacy and Pharmacokinetics, K. Marcinkowski University of Medical Sciences, ul. Święcickiego 6, 60-781 Poznań

autor

Jarmołowicz A.

• Department of Physical Pharmacy and Pharmacokinetics, K. Marcinkowski University of Medical Sciences, ul. Święcickiego 6, 60-781 Poznań

Bibliografia

• 1. Crom W.R., A Clinician's Guide to Chemotherapy. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics, [Grochow L.B., Ames M.M., Eds], Williams and Wilkins, Baltimore, 1998.
• 2. Rask C., Albertioni F., Bentzen S.M., Schroeder H. and Peterson C., Acta Oncol., 37, 227 (1998).
• 3. Borsi J.D., Wesenberg F., Stokland T. and Moe P., Eur. J. Cancer, 27, 1006 (1991).
• 4. Masson E., Relling M.V. and Synold T.W., J. Clin. Invest., 97, 73, (1996).
• 5. Zoubek A., Zaunschrim H.A., Lion T., Fischermeister G., Vollnhofer G. and Gadner H., Pediatr. Haematol. Oncol., 12, 471 (1995).
• 6. Widemann B.C., Hetherington M.L., Murphy R.F., Balis F.M. and Adamson P.C., Cancer, 76, 521 (1995).
• 7. Widemann B.C., Balis F.M., O’Brien M., Cole D., Murphy R.F., Montello M. and Shriner D., Proc. ASCO, 17, 222 (1998).
• 8. Widemann B.C., Balis F.M., Murphy R.F., Sorensen J. and Montello M., J. Clin. Oncol., 15, 2125 (1997).
• 9. Widemann B.C., Sung E., Anderson L., Salzer W.L., Balis F.M., Monitjo K.S., McCully C., Hawkins M. and Adamson P.C., J. Pharmacol. Exp. Therapeut., 294, 894 (2000).
• 10. Albertioni F., Rask C., Exborg S., Poulsen J.H., Petterson B., Beck O. and Peterson C., Clin. Chem., 42, 39 (1996).
• 11. Skibińska Ł. and Gregorczyk J., Chem. Anal. (Warsaw), 46, 329 (2001).
• 12. Albertioni F., Petterson B., Beck O., Rask C., Seideman P. and Peterson C., J. Chrom. B., 665, 163 (1995).