Application of derivatives of UV spectra and similarity indices to identification of milk proteins separated using reversed-phase high performance liquid chromatography

• Autorzy: Minkiewicz P. , Dziuba J. , Nałęcz D.

Warianty tytułu

PL

Zastosowanie pochodnych widm UV oraz wskaźników podobieństwa do identyfikacji białek mleka rozdzielonych za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej w odwróconej fazie

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The method which may be applied as a tool for identification of proteins separated using reversed-phase high performance liquid chromatography, based on similarity indices of UV spectra derivatives, was proposed. Commercial milk protein preparations such as sodium and calcium caseinates, whey protein concentrate and milk protein coprecipitate as well as standards of milk proteins were used in the experiment. Statistical significance of difference between first and second similarity index, evaluated with Student's t test was used as a criterion to choose the mathematical treatment of spectra as well as to predict reliability of identification. First derivatives of spectra revealed the highest value of t parameter, The presence of statistically significant difference between first and second similarity indices always led to correct identification of proteins. The presented method enabled appropriate identification of caseins in commercial milk protein preparations, but failed ill the case of whey proteins.

PL

Zaproponowano metodę identyfikacji białek - rozdzielonych za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej w odwróconej fazie - na podstawie wskaźników podobieństwa (ST) pochodnych widm UV [równanie (1)]. Badano handlowe preparaty białek mleka, takie jak kazeinian wapnia, ka-zeinian sodu, koncentrat białek serwatkowych oraz koprecy-pitat białek mleka. Statystyczna istotność różnic między pierwszym a drugim wskaźnikiem podobieństwa, obliczona na podstawie testu t Studenta, posłużyła jako kryterium wyboru obróbki widm oraz do sprawdzenia wiarygodności identyfikacji białek. Pierwsze pochodne widm UV wykazały największą wartość parametru t (tabela 1). Jedynie występowanie statystycznie istotnych różnic między pierwszym a drugim wskaźnikiem podobieństwa zawsze prowadziło do poprawnej identyfikacji białek (tabela 2). Proponowana metoda umożliwiła prawidłową identyfikację poszczególnych frakcji kazeiny w handlowych preparatach białek mleka, ale nie pozwoliła na identyfikację białek serwatkowych.

Słowa kluczowe

EN

polymer streams weld line; reversed-phase HPLC; UV spectroscopy; similarity indices of UV spectra derivatives

PL

identyfikacja białek; HPLC w odwróconej fazie; spektroskopia UV; wskaźniki podobieństwa pochodnych widm UV

• Wydawca: Sieć Badawcza Łukasiewicz – Instytut Chemii Przemysłowej
• Czasopismo: Polimery
• Rocznik: 2003
• Tom: T. 48, nr 2
• Strony: 106--110
• Opis fizyczny: Bibliogr. 24 poz.

Twórcy

autor

Minkiewicz P.

• Univesity of Warmia iand Mazury in Olsztyn, Chair of Food Biochemistry, Plac Cieszyński 1, 10-726 Olsztyn-Kortowo, Poland

autor

Dziuba J.

• Univesity of Warmia iand Mazury in Olsztyn, Chair of Food Biochemistry, Plac Cieszyński 1, 10-726 Olsztyn-Kortowo, Poland

autor

Nałęcz D.

• Univesity of Warmia iand Mazury in Olsztyn, Chair of Food Biochemistry, Plac Cieszyński 1, 10-726 Olsztyn-Kortowo, Poland

Bibliografia

• 1. Mann M., Hendrickson В. C., Pandey A.: Ann. Rev. Biochem. 2001,70, 437.
• 2. Riordon J. R.: Anal. Chem. 2000, 72, A483.
• 3. Grego В., Nice E. C , Simpson R. J.: J. Chromatogr. 1986,352,359.
• 4. Palladino D. E. H., Cohen K. A.: J. Chromatogr. Sci. 1990,29, 91.
• 5. Young P. M., Gorenstein M. V: LC-GC Ini. Mag. Separ. Sci. 1994,12, 832.
• 6. Perrin E., Miclo L., Driou A., Linden G.: J. Chromatogr. В 1995, 664, 267.
• 7. Zhao Q., Sannier E, Garreau I., Lecoeur C , Piot J. M.: J. Chromatogr. A 1996, 723,35.
• 8. Bartolome B., Moreno-Arribas V., Pueyo E., Polo C : J. Agr. Food Chem. 1997, 45, 3374.
• 9. Macaud C , Zhao Q. Y., Ricart G., Piot J. M.: J. Luj. Chromatogr. Relat. Technol. 1999, 22, 401.
• 10. Darewicz M., Dziuba J., Mioduszewska H., Minkiewicz P: Acta Aliment. Hung. 1999, 28,339.
• 11. Minkiewicz P, Slangen C. J., Dziuba J., Visser S., Mioduszewska H.: Milchwissenschaft 2000, 55,14.
• 12. Dziuba J., Nałęcz D., Minkiewicz P: Anal. Chim. Acta 2001, 449, 243.
• 13. Miclo L., Perrin E., Driou A., Papadopoulos V., Boujrad N., Vanderesse R., Bondier J. E, Desor D., Linden G„ Gaillard J. L.: FASEB J. 2001,15, U466.
• 14. Thompson M. R: J. Dairy Sci. 1966,49, 792.
• 15. Visser S., Slangen C. J., Rollema H. S.: J. Chromatogr. 1991,548, 361.
• 16. Gaucheron E: Milchwissenschaft 2001, 56,183.
• 17. Wilce M. J. C., Aguilar M. I., Hearn M. T. W.: Anal. Chem. 1995,67,1209.
• 18. Yayalayan V. A.: Trends Food Sci. Technol. 1997, 8,13.
• 19. Martins S. I. E S., Jongen W. M. E, van Boekel M. A. J. S.: Trends Food Sci. Technol. 2001,11, 364.
• 20. Fayle S. E., Healy J. R, Brown P. A., Reid E. A., Gerrard J. A., Ames J. M.: Electrophoresis 2001, 22,1518.
• 21. Singh H., Creamer L. K.: "Proteins" in "Advanced Dairy Chemistry", vol. 1 (Ed. Fox P. E), Elsevier Applied Science, London 1992, p. 621—656.
• 22. Padros E., Dunach M., Morros A., Sabes M., Manosa J.: Trends Biochem. Sci. 1984, 9,508.
• 23. Bray M. R., Carriere A. D., Clarke A. J.: Anal. Biochem. 1994, 221, 278.
• 24. Peitgen H.-O., Jurgens H., Saupe D.: "Fractals for the Classroom", Springer-Verlag, New York 1992 (Polish edition entitled: "Fraktale i chaos", PWN, Warszawa 1995).