Wieloparametryczna cytometria przepływowa jako nowa technika w ręku diagnosty laboratoryjnego. Część I

• Autorzy: Sędek Ł. , Mazur B.
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Cytometria przepływowa to wysoce specjalistyczna metoda analityczna, umożliwiająca jednoczesny pomiar wielu biochemicznych i biofizycznych, właściwości zawieszonych w cieczy komórek i/lub ich składowych. Technika opiera się na zastosowaniu przeciwciał monoklonalnych sprzężonych z barwnikami fluorescencyjnymi. Pomiar cytometryczny polega na analizie światła rozproszonego przez komórki oraz fluorescencji emitowanej na skutek wzbudzenia barwników. Informuje on o ich wielkości, wewnętrznej złożoności (ziarnistości) oraz ich składzie antygenowym. W skład cytometru przepływowego wchodzi układ ciśnieniowo-cieczowy, optyczny ze źródłem światła (laserem) oraz elektroniczny. Cytometry wyposażone są w przynajmniej jeden laser, emitujący światło o określonej długości fali. Liczba laserów determinuje maksymalną liczbę barwników fluorescencyjnych, jakie mogą być jednocześnie użyte. Podstawą przeprowadzenia adekwatnych pomiarów jest prawidłowa kalibracja aparatu oraz staranna kontrola jakości jego pracy.

EN

Flow cytometry is a highly specific analytical technique enabling simultaneous measurement of many biochemical and biophysical properties of cells or their fragments. The technique is based on application of monoclonal antibodies conjugated with fluorescent dyes. Flow cytometric assay relies on analysis of tight scattered on the cells as well as fluerescences emitted by excited dyes. This gives an idea about cell size, their internal complexity and antigen expression. Flow cytometers consist of three main systems: fluidics, optics with light source (laser) and electrincs. Flow cytometers are equipped in at least one laser emmiting light of particular wave lenght. The number of lasers determines the maximum number of fluorescent dyes to be used at the same time. The key to obtain adequate results is proper calibration and conscientious quality control.

Słowa kluczowe

PL

cytometria przepływowa; barwniki fluorescencyjne; laser; przeciwciała monoklonalne

EN

flow cytometry; fluorescent dyes; laser; monoclonal antibody

• Wydawca: ELAMED Media Group
• Czasopismo: Laboratorium - Przegląd Ogólnopolski
• Rocznik: 2007
• Tom: nr 3
• Strony: 45--48
• Opis fizyczny: Bibliogr. 18 poz., rys.

Twórcy

autor

Sędek Ł.

• Śląska Akademia Medyczna, Katedra i Klinika Pediatrii, Hematologii i Onkologii Dziecięcej, Zabrze

autor

Mazur B.

• Śląska Akademia Medyczna, Katedra i Zakład Mikrobiologii i Immunologii, Zabrze

Bibliografia

• 1. Baran J.: Cytometria przepływowa- istota metody i jej wykorzystanie. ‘Mikrobiol. Med.”, 1996, 3(8),33-40
• 2. Herzenberg L.A., Parks D., Sahar B., Perez O., Roederer M.: The history and future of the fluoerescence activated cel sorter and flow cytometry a view from Stanford. „Clin. Chem.”, 2002, 48(10), 1819-1827.
• 3. Brown M., Wittwer C.: Flow cytometry: principles and clinical applications in hematology. „Clin. Chem.”, 2000, 46(8), 1221-1229.
• 4. Ortao A., Schmitz G., Brando B., Ruiz Arguelles A. et al.: Clinically useful information provided by the flow cytometric immunophenotyping of hematological malignancies: current status and future directions. „Clin. Chem.” 1999, 45, 1708-17.
• 5. Pituch-Noworolska A.: Zastosowanie cytometrii przepływowej do diagnostyki białaczek i chłoniaków niezirarniaczych. „Centr.” Eur. J. Immunol.”, 1996, 21, 138-146.
• 6. Ortao A., Lopez A., Flores J., Almeida J., Vidriales B.M. et al.: Diagnosis of haematological maignancies: new applications for flow cytometry. „Hematology”, 2006, 2, 6-13 (Education Program of the 11th Congress of the European Hematlogy Association, Amsterdam, The netherlands June 15-18, 2006).
• 7. Lorenzana R., Coustan-Smith E., Antillon F. et al.: Simple methods for the rapis exchange of flow cytometric data between remote centers „Leukemia:, 1999, 14, 336-337.
• 8. Kaczmarek A., Tatsuya O. Leporowska E., Mackiewicz A.: Rola i miejsce cytometrii przepływowej w diagnostyce klinicznej. „Współczesna Onkologia”, 2002, 6(6), 366-373.
• 9. Wiktorowicz K.: Zastosowanie cytometrii przepływowej w diagnostyce. „Post N. Med.”, 1998, 11(5-6), 74-78.
• 10. Wood B.: 9 and 10 color flow cytometry in the clinical laboratory. „Arch. Patrol. Lab. Med.”, 2006, 130-680-690.
• 11. Gołąb J., Jakobisiak M., Lasek W. (red): Immunologia. Warszawa 2002, Wydawnictwo Naukowe PWN.
• 12. Zola H., Swart B., Nicholson I., Aasted B., Bensussan A., Boumsell L., Buckley C., Clark G., et al.: CD molecules 2005 – Human cel differentia molecules. „Blond”, 1, 106-(9).
• 13. Kantorski J.: Podstawy cytometrii przepływowej. „Centr. Eur. J. Immunol.”, 1996, 21, 87-93.
• 14. Radcliff G., Jaroszewski M.J.: Basics of flow cytometry. „Methods. Mol. Biol.”, 1998, 91, 1-24.
• 15. Givan AL.: Flow cytometry: an introduction. „Methods. Mol. Biol.”, 2004, 263, 1-32.
• 16. Maecker H.T., Trotter J.: Flow Cytometry Controls, Instrument Setup, and the Determination of Positivity. „Cytometry Part A”, 2006, 69A, 1037-1041.
• 17. www.republika.pl/sq7dqx/hematologia/.
• 18. BD FACSDiva Software Reference Manual.