Hydroliza enzymatyczna wiązania peptydowego z oporami dyfuzyjnymi

• Autorzy: Niesobska A. , Trusek-Hołownia A.

Warianty tytułu

EN

Enzymatic hydrolysis of peptide bonds with diffusion resistance

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Przedmiotem badań była reakcja sprzęgania wybranej cząsteczki modelowej H-D-Tyr-OMe z nośnikiem stałym CM Sepharose. Reakcje prowadzono w buforach do aktywacji i sprzęgania różniących się odczynem pH w celu znalezienia warunków sprzyjających efektywnej immobilizacji. Następnie prowadzono hydrolizę utworzonego wiązania Ugand (aminokwas) - nośnik z wykorzystaniem różnych enzymów proteolitycznych (termolizyna, proteaza z B. licheniformis (subtylizyna), α-chymotrypsyna, proteaza z Rhizopus sp.). Sprawdzano także przebieg hydrolizy peptydów immobilizowanych na nośniku stałym. Badania wykazały potrzebę ustalenia warunków dla procesów sprzęgania i hyrolizy, w tym uwzględnienie oporów sferycznych w dostępie enzymu do substratu, celem uzyskania jak najwyższej wydajności.

EN

The object of the study was the coupling reaction of the selected molecule model HD-Tyr-OMe CM Sepharose solid support. The reactions were carried out in buffers for activation and coupling in a different pH value to find favorable conditions for the effective immobilization. Then, the hydrolysis of formed ligand (amino acid) - the carrier was carried out using different proteolytic enzymes (thermolysin, protease from B. licheniformis (subtilisin), α-chymotrypsin, protease from Rhizopus sp.). Also the hydrolysis of peptide immobilized on a solid support was checked. The research showed the need to optimize conditions for the formation of ligand -carrier bond and followed by the enzymatic hydrolysis, including the spherical access resistance of enzyme to substrate in order to obtain the best efficiency.

Słowa kluczowe

PL

nośnik stały; hydroliza; opory sferyczne

EN

solid carrier; hydrolysis; spherical resistance

• Wydawca: Stowarzyszenie Inżynierów i Techników Mechaników Polskich
• Czasopismo: Inżynieria i Aparatura Chemiczna
• Rocznik: 2015
• Tom: Nr 4
• Strony: 186--188
• Opis fizyczny: Bibliogr. 6 poz., rys., tab.

Twórcy

autor

Niesobska A.

• Zakład Inżynierii Bioprocesowej i Biomedycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Wrocławska, Wrocław

autor

Trusek-Hołownia A.

• Zakład Inżynierii Bioprocesowej i Biomedycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Wrocławska, Wrocław

Bibliografia

• 1. Dumoulin Y., Cartilier L.H., Mateescu M.A., 1999. Cross-linked amylose tablets containing a-amylase: an enzymatically-controlled drug release system. J. Control. Release, 60, 161-167. DOI: 10.1016/S0168- 3659(99)00065-6
• 2. Nakajima N., Ikada Y., 1995. Mechanism of Amide Formation by Carbodiimide for Bioconjugation in Aqueous Media. Bioconjugate Chem., 6, 123- 130. DOI: 10.1021/bc00031a015
• 3. Pieper J.S., Hafmans T., Veerkamp J.H., van Kuppevelt T.H., 2000. Development of tailor-made collagen-glycosaminoglycan matrices: EDC/NHS crosslinking, and ultrastructural aspects. Biomaterials, 21, 581-93. DOI: 10.1016/S0142-9612(99)00222-7
• 4. Trusek-Holownia A., Jaworska P., 2014. Polymeric drug carriers - Control of the daily dose and therapy duration. Biocybern. Biomed. Eng. (on-line version). DOI: 10.1016/j.bbe.2014.11.001
• 5. Vilar G., Tulla-Puche J., Albericio F., 2012. Polymers and drug delivery systems. Curr. Drug Deliv., 9, 367-94. DOI: 10.2174/ 156720112801323053
• 6. Wissink M.J.B., Beernink R., Pieper J.S., Poot A.A., Engbers G.H.M., Beugeling T., van Aken W.G., Feijen J., 2001. Immobilization of heparin to EDC/NHS-crosslinked collagen. Characterization and in vitro evaluation. Biomaterials, 22, 151-163. DOI: 10.1016/S0142-9612(00)00164-2