How specially adapted chromatographic bed material might be used for the controlled formation of immune complexes and studies of Congo red binding to bivalent antibodies

• Autorzy: Drozd A. , Konieczny L. , Piekarska B. , Rybarska J. , Stopa B. , Zemanek G.

Warianty tytułu

PL

Jak specjalnie skonstruowany chomatograficzny materiał może być wykorzystany dla kontrolowanego tworzenia kompleksów immunologicznych i analizy biwalentnych antygenów wiążących czerwień Kongo

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Antibodies are the proteins that are designed biologically to recognize the foreign materiał in the organism and to initiate the process of its destruction and its removal. The functional connection of these two activities linked structurally to separate parts of antibody molecule is although critical, still poorly understood. The reason lies in the complexity of the phenomenon caused mainly by the natural heterogeneity of active immune complexes and their insolubility making the use of standard analytical techniques ineffective. A special analytical technique was hence elaborated to bypass the problem. It is based on using Congo red self-assembling dye as an indicator of binding bivalent antibodies to antigenic determinants fixed to the chromatographic bed selected for this aim. This technique allows for the controlled formation of immune complexes disclosing the dye binding effects as well as their easy removal for analytical purposes.

PL

Antygeny są białkami przeznaczonymi przez ewolucję do rozpoznawania obcego dla danego organizmu materiału biologicznego w celu inicjacji procesów destrukcji obcego ciała i jego usunięcia. Funkcjonalne połączenie dwóch aktywności (rozpoznania przeciwciała oraz inicjacji reakcji degradacji) jest krytyczne dla żywego organizmu. Proces ten nie jest jednak rozpoznany. Przyczyną tego jest dość duża złożoność tego procesu, czego przyczyną jest dość duża różnorodność kompleksów immunologicznych i ich nierozpuszczalność w warunkach eksperymentów. W tym celu opracowana została technika oparta na wiązaniu ciekłokrystalicznego liganda czerwieni Kongo, który okazał się być markerem dla wiązania antygenu angażującego oba ramiona cząsteczki IgG wiązanego do specjalnego podłoża chromatograficznego. Ta technika pozwala na kontrolowane tworzenie kompleksów immunologicznych ujawniając tworzenie kompleksów w sposób odwracalny, co ma istotne znaczenie dla celów analitycznych.

Słowa kluczowe

EN

immunological signal; self-assembling ligand; immunological complex

PL

kompleksy immunologiczne; ligand ciekłokrystaliczny; sygnał immunologiczny

• Wydawca: Uniwersytet Jagielloński - Collegium Medicum ; Index Copernicus Sp. z o.o.
• Czasopismo: Bio-Algorithms and Med-Systems
• Rocznik: 2006
• Tom: Vol. 2, no. 4
• Strony: 25--28
• Opis fizyczny: Bibliogr. 15 poz., rys.

Twórcy

autor

Drozd A.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

autor

Konieczny L.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

autor

Piekarska B.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

autor

Rybarska J.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

autor

Stopa B.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

autor

Zemanek G.

• Chair of Medical Biochemistry, Collegium Medicum - Jagiellonian University, Kopernika 7, 31-034 Kraków, Poland

Bibliografia

• 1. G.M. Edelman (1970). The covalent structure of human ãG immunoglobulin. XI. Functional implications. Biochemistry 9, 3197-3205.
• 2. N.J. Calvanico, T.B. Tomasi Jr (1979). Effector sites on antibodies. In: Atassi MZ Ed, Immunochemistry of proteins. Vol. 3. New York and London, Plenum Press, 1-85.
• 3. H. Metzger (1990). General aspects of antibody structure and function. In: Fc receptors and the action of antibodies. Ed. H. Metzger. Am. Soc. Microbiol, 7-11.
• 4. T.N. Bhat, G.A. Bentley, T.O. Fischmann, G. Boulot, R.J. Poljak (1990). Small rearrangements in structures of Fv and Fab fragments of antibody D1,3 on antigen binding. Nature 347, 483-485.
• 5. U. Schulze-Gahmen, J.M. Rini, LA. Wilson (1993). The detailed analysis of the free and bound conformations of an antibody. X-ray structures of Fab 17/9 and three different Fab peptide complexes. J. Mol. Biol. 234, 1098-1118.
• 6. W.R. Tulip, J.N. Varghese, R.G. Webster, W.G. Laver, P.M. Colman (1992). Crystal structures of two mutant neuraminidase-antibody complexes with amino acid substitution in the interface. J. Mol. Biol. 227, 149-159.
• 7. L.W. Guddat, L. Shan, J.M. Anchin, D.S. Linthicum, A.B. Edmundson (1994). Local and transmitted conformational changes on complexation of an anti-sweetener Fab. J. Mol. Biol. 236, 247-274.
• 8. LA. Wilson, R.L. Stanfield (1994). Antibody-antigen interactions: new structures and new conformational changes. Curr. Op. Struct. Biol. 4, 4857-4867.
• 9. J. Kaszuba, L. Konieczny, B. Piekarska, I. Roterman, J. Rybarska (1993). Bis-azo dyes intereference with effector activation of antibodies. J. Physiol. Pharmacol. 44, 233-242.
• 10. M. Król, I. Roterman, A. Drozd, L. Konieczny, B. Piekarska, J. Rybarska, P. Spólnik, B. Stopa (2006). The increased flexibility of CDR Loos generated In antibodies by Congo red complexation favors antygen binding. J. Biomol. Struct Dynam. 23, 407-415.
• 11. B. Piekarska, A. Drozd, L. Konieczny, M. Król, W. Jurkowski, I. Roterman, P. Spólnik, B. Stopa, J. Rybarska (2006). The indirect generation of long-distance structural changes in antibodies upon their binding to antygen. Chem. Biol. Drug Des 68, 276-283.
• 12. M. Król, I. Roterman, B. Piekarska, L. Konieczny, J. Rybarska, B. Stopa (2003). Local and long-range structural effects caused by the removal of the N-terminal polypeptide fragment from immunoglobulin L chain. Biopolymers 69,189-200.
• 13. J. Rybarska, L. Konieczny, I. Roterman, B. Piekarska (1991). The effect of azo dyes on the formation of immune complexes. Archiv. Immunol. Ther. Exp. 39, 317-327.
• 14. B. Piekarska, L. Konieczny, J. Rybarska, B. Stopa, G. Zemanek, E. Szneler, M. Król, M. Nowak, I. Roterman (2001). The heat induced formation of a specific binding site for self-assembled Congo red in V domain of immunoglobulin chain I. Biopolymers 59, 446-456.
• 15. B. Piekarska, L. Konieczny, J. Rybarska, B. Stopa, P. Spólnik, I. Roterman, M. Król (2004). Intramolecular signaling in immunoglobulins - New evidence emerging from the use of supramolecular protein ligands. J. Physiol. Pharmacol. 55, 487-501.